LMP-1转染人胎盘源间充质干细胞前后蛋白质组学研究

作     者：宋立杰 杨军星 王瑶 卢亚东 杨楠 金鑫 孙梦洁 刘志辉 王博蔚 朱镇 SONG Li-jie;YANG Jun-xing;WANG Yao;LU Ya-dong;YANG Nan;JIN Xin;SUN Meng-jie;LIU Zhi-hui;WANG Bo-wei;ZHU Zhen

作者机构：吉林大学口腔医院吉林长春130021 吉林大学第二医院吉林长春130022 

出 版 物：《口腔医学研究》 (Journal of Oral Science Research)

年 卷 期：2017年第33卷第5期

页      面：525-529页

学科分类：1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 100101[医学-人体解剖与组织胚胎学] 10[医学] 

基　　金：吉林省医药产业推进计划(编号:20140311088YY 201603028YY) 长春市重大科技攻关计划(编号:2014054) 吉林省科技攻关计划(编号:20150204004YY) 长春市"双十工程"计划(统带:16SS12) 

主　　题：LMP-1 hPDMSCs 蛋白质组学 

摘      要：目的:采用蛋白质组学技术检测LIM矿化蛋白-1(LIM mineralization protein-1,LMP-1)转染人胎盘源间充质干细胞(Human placenta-derived mesenchymal stem cells,hPDMSCs)前后蛋白质组学改变。方法:提取hPDMSCs LMP-1和hPDMSCsvector细胞总蛋白,通过二维凝胶电泳(two-dimensional gel electrophoresis,2-DE)制备两组细胞的二维电泳图谱,并用PDQuest软件进行图像分析,寻找差异表达的蛋白质点,并用基质辅助激光解吸粒子-飞行时间电离质谱(matrix-assisted laser desorption-ionization time-of-flight tandem mass spectrometry,MALDI-TOF-MS)分析技术对这些差异表达的蛋白质点进行鉴定,并选取6个与成骨相关的蛋白(PCNA,vimentin,annexin A1,annexin A2,eEF2和peroxiredoxin-1)作为验证对象,蛋白质印迹法检测各蛋白在两组细胞中的表达水平。结果:采用2-DE技术建立了hPDMSCsLMP-1和hPDMSCsvector两组细胞的二维电泳图谱;PDQuest软件分析图像发现两组细胞有22个差异蛋白质点,采用MALDI-TOF-MS质谱初步鉴定出15个蛋白质点,其中表达上调9个,下调6个。Western blot检测结果与蛋白质组学一致。结论:LMP-1基因转染hPDMSCs后共筛选获得15个差异表达的蛋白,它们是成骨分化潜在的重要参与者,为进一步阐明LMP-1对hPDMSCs细胞功能和成骨分化影响的分子机制奠定基础。