shRNA干扰ASCT2基因表达对结肠癌细胞生物学行为的影响

作     者：蔡灿锋 曾兵 曾军 辛海洋 唐超明 Cai Canfeng;Zeng Bing;Zeng Jun;Xin Haiyang;Tang Chaoming

作者机构：广州医科大学附属第六医院胃肠外科广东省清远市人民医院胃肠外科510120 

出 版 物：《中华胃肠外科杂志》 (Chinese Journal of Gastrointestinal Surgery)

年 卷 期：2017年第20卷第4期

页      面：450-454页

核心收录：

学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金（81401996） 广东省自然科学基金（2015A030310099） 广东省医学科研基金（A2014228） 清远市科技计划项目（20148056） 

主　　题：结肠肿瘤 基因 ASCT2 谷氨酰胺代谢 生物学行为 

摘      要：目的探讨shRNA下调谷氨酰胺转运体ASCT2对结肠癌细胞Lovo和SW480生物学行为的影响。方法利用Lipofectamine2000介导ASCT2-shRNA的表达载体转染结肠癌细胞Lovo和SW480，通过反转录PCR和western blot分别检测转染后ASCT2mRNA及蛋白的表达情况：分别应用MTY法和transwell法检测其结肠癌细胞增殖和侵袭能力；应用放射示踪法检测结肠癌细胞对谷氨酰胺的摄取情况。结果shASCT2转染后，Lovo和SW480细胞中ASCT2mRNA及蛋白水平均显著下调（P〈0．01）。shASCT2转染后，Lovo和SW480细胞增殖能力（A490）和细胞侵袭能力（透膜细胞数）均较对照组细胞显著减弱（均P〈0．01）；其中Lovo细胞中实验组和对照组的透膜细胞数分别为46．3±5．9和197，7±9．1，SW480细胞中实验组和对照组的透膜细胞数分别为29．7±3．8和139．0±9．5。放射示踪法检测显示，shASCT2转染后，Lovo和SW480细胞对谷氨酰胺的摄取受到显著抑制，其中，对Lzvo细胞的抑制率为79．15％，对SW480的抑制率为67．22％，差异均有统计学意义（均P〈0．01）。结论ASCT2在结肠癌中发挥癌基因的作用，其促进结肠癌进展的机制可能与谷氨酰胺代谢有关．有望成为肿瘤代谢治疗的重要靶点。