重组毒素rCCK_(96-104)PE38靶向结肠癌生物特性研究

作     者：张嵩 柳溪林 李萌 常江 高世奇 胡盼 柳增善 ZHANG Song LIU Xi-lin LI Meng CHANG Jiang GAO Shi-qi HU Pan LIU Zeng-shan

作者机构：吉林大学动物医学学院人兽共患病研究所教育部重点实验室长春130062 吉林大学中日联谊医院长春130033 

出 版 物：《生物技术通报》 (Biotechnology Bulletin)

年 卷 期：2017年第33卷第4期

页      面：247-252页

学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

基　　金：国家青年科学基金项目(81401953) 中国博士后科学基金面上项目(2014M561303) 中国博士后科学基金特别资助项目(2015T80312) 吉林省青年基金项目(20160520162JH) 教育部博士点基金项目(20120061110078) 吉林省科学技术厅计划项目(20120966) 

主　　题：重组毒素 结肠癌 胆囊收缩素 绿脓杆菌外毒素 

摘      要：旨在原核表达并纯化新型重组毒素rCCK_(96-104)PE38,验证其对结肠癌细胞的靶向杀伤作用。使用基因扩增技术将反向编译的胆囊收缩素CCK_(96-104)与绿脓杆菌外毒素PE38融合,构建原核表达载体。利用Ni-NTA亲和层析进行纯化。通过结肠癌细胞体外杀伤实验以及结肠癌裸鼠模型的治疗验证rCCK_(96-104)PE38的抗肿瘤能力。结果显示,扩增出的rCCK_(96-104)PE38序列正确,成功利用pET-28a原核表达系统实现了活性表达。纯化后的重组蛋白能够在体外诱导结肠癌细胞凋亡,并能抑制裸鼠模型体内的肿瘤生长。成功制备高纯度、无标签的rCCK_(96-104)PE38重组免疫毒素,体内、体外实验证实其具有抑制结肠癌的能力。