HBV共价闭合环状DNA功能化纳米颗粒制备及鉴定

作     者：郭永灿 王友强 魏聪 邓冲 赵容 邹霞 涂植光 GUO Yongcan;WANG Youqiang;WEI Cong;DENG Chong;ZHAO Rong;ZOU Xia;TU Zhiguang

作者机构：西南医科大学附属中医医院检验科泸州646000 重庆医科大学检验医学院重庆400016 

出 版 物：《福建医科大学学报》 (Journal of Fujian Medical University)

年 卷 期：2016年第50卷第6期

页      面：370-374页

学科分类：100208[医学-临床检验诊断学] 1004[医学-公共卫生与预防医学(可授医学、理学学位)] 1002[医学-临床医学] 100401[医学-流行病与卫生统计学] 10[医学] 

基　　金：泸州市重点科技计划项目(2014-S-49) 西南医科大学校级课题(2015-YJ028) 

主　　题：*DNA,病毒 DNA,环状 纳米粒子 

摘      要：目的制备HBV共价闭合环状DNA(cccDNA)功能化磁性纳米颗粒,为进一步建立富集分离和检测cccDNA方法奠定基础。方法通过亲和素修饰纳米颗粒表面,利用亲和素与生物素的亲和作用,将亲和素修饰的纳米颗粒与生物素标记的cccDNA特异性探针偶联,制备cccDNA功能化纳米颗粒,最后用cccDNA探针完全互补的荧光标记序列与功能化纳米颗粒反应,鉴定其特性。结果亲和素修饰的纳米颗粒能结合生物素最大量为1 205ng/mg;通过与亲和素作用,生物素标记cccDNA特异性探针固定在磁性纳米微粒表面,其最大结合生物素标记探针量为3.2×10^(-9) mol/mg;cccDNA功能化纳米颗粒可捕获与其互补的荧光标记寡核苷酸序列,其最大捕获量为2.0×10^(-9) mol/mg,并能通过变性释放出保持生物学活性游离的荧光标记寡核苷酸序列。结论成功构建的cccDNA功能化纳米微粒能有效捕获与其互补的序列,其捕获量能达到cccDNA的分离提取要求。