共刺激分子配体B7-H1基因真核表达载体和转基因细胞的构建

作     者：冯洁 王光凤 孙强 邢华 李厚达 

作者机构：上海实验动物研究中心上海200032 上海市医药工业研究院上海200437 扬州大学兽医学院江苏扬州225009 

出 版 物：《扬州大学学报（农业与生命科学版）》 (Journal of Yangzhou University：Agricultural and Life Science Edition)

年 卷 期：2005年第26卷第3期

页      面：17-20页

核心收录：

学科分类：0710[理学-生物学] 1002[医学-临床医学] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[理学-遗传学] 100214[医学-肿瘤学] 0901[农学-作物学] 0836[工学-生物工程] 090102[农学-作物遗传育种] 10[医学] 

基　　金：国家"十五"科技攻关项目(2001BA70113) 

主　　题：肿瘤细胞 共刺激分子 B7-H1基因 真核表达 

摘      要：以PHA刺激的小鼠外周血单核细胞中抽提的总RNA为模板,通过RT-PCR技术,扩增出B 7-H 1基因。按常规方法克隆进pEF 6V 5H is A载体,重组质粒经鉴定后采用脂质体法转染CHO细胞,48 h后进行间接免疫荧光试验,72 h后用B lastic id in进行筛选,挑选出能稳定表达B 7-H 1的细胞株。结果表明:成功地克隆小鼠B 7-H 1基因并构建了用于表达B 7-H 1基因的真核表达载体,经间接免疫荧光试验证明,该基因在CHO细胞中得到表达。经W estern-b lotting检测表明筛选出的转基因细胞稳定表达了B 7-H 1基因。