小檗碱对果糖诱导人肾小管细胞内质网应激PERK凋亡通路的影响

作     者：张勇 黄春来 付婷婷 陈小青 王丽萍 庄永泽 ZHANG Yong;HUANG Chun-lai;FU Ting-ting;CHEN Xiao-qing;WANG Li-ping;ZHUANG Yong-ze

作者机构：南京军区福州总医院肾脏科福州350025 

出 版 物：《解放军医学杂志》 (Medical Journal of Chinese People's Liberation Army)

年 卷 期：2017年第42卷第1期

页      面：6-11页

核心收录：

学科分类：0710[理学-生物学] 1002[医学-临床医学] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金(81373837) 福建省自然科学基金(2014J01371)~~ 

主　　题：内质网应激 肾小管 细胞凋亡 小檗碱 

摘      要：目的探讨小檗碱对果糖诱导下肾小管上皮细胞凋亡的影响。方法人肾小管上皮细胞株(HK-2细胞)于含10%胎牛血清的DMEM培养基中进行体外培养,然后随机分为正常组(C组)、果糖组(F组,含25mmol/L果糖培养液)、小檗碱组(B组,25mmol/L果糖+10μmol/L小檗碱)和TUDCA组(T组,25mmol/L果糖+2μmol/L TUDCA培养液)。培养24h后收集细胞,Western blotting检测葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、CHOP蛋白表达水平及蛋白激酶R样内质网激酶(PERK)、真核启始因子2α(e IF2α)的磷酸化水平,流式细胞仪检测各组细胞周期情况,TUNEL法检测各组细胞凋亡率。结果与C组比较,F组GRP78、CHOP蛋白表达水平上调,同时p-PERK、p-e IF2α水平明显上升(P0.05);与F组比较,B组、T组GRP78、CHOP、p-PERK、p-e IF2α表达水平均明显下降(P0.05);T组与B组GRP78、CHOP、p-P E R K、p-e I F 2α表达水平比较无明显差异。与C组比较,F组H K-2细胞活力明显降低,细胞凋亡指数明显升高(P0.05);与F组比较,B组和T组肾小管上皮细胞活力明显增加,细胞凋亡指数明显下降(P0.05);T组B组细胞活力指数、细胞凋亡率比较无明显差异。结论持续采用果糖培养HK-2细胞可激活细胞内PERK通路,引起内质网应激的发生,小檗碱能够抑制果糖诱导的PERK和e IF2α的磷酸化,下调GRP78、CHOP表达,从而调控PERK通路缓解细胞周期阻滞现象,降低细胞凋亡率。