S(yp) Y279和Y304介导了BcrAbl与Grb2等蛋白的结合

作     者：朱奎 刘小萍 叶芳耘 

作者机构：东方肝胆外科研究所肿瘤免疫与基因治疗中心!上海200433 第二军医大学长海医院实验诊断科/中心实验室 

出 版 物：《Acta Biochimica et Biophysica Sinica》 (生物化学与生物物理学报(英文版))

年 卷 期：1999年第31卷第4期

页      面：450-452页

核心收录：

学科分类：0710[理学-生物学] 071010[理学-生物化学与分子生物学] 07[理学] 

基　　金：国家自然科学基金 

主　　题：Bcr Abl激酶 Syp 信号传导 

摘      要：利用体外定点突变技术获得Ｓｙｐ Ｙ２７９Ｆ、Ｙ３０４Ｆ和Ｙ５４６Ｆ突变的ｃＤＮＡ， 将这些突变体和野生型Ｓｙｐ 分别构建入ｐＸＭ 真核表达载体， 转入Ｋ５６２ 细胞。经Ｗｅｓｔｅｒｎ 印迹证明， 各转染Ｋ５６２ 细胞中都有Ｓｙｐ 蛋白的表达。免疫沉淀与免疫印迹结果发现ＷＴ、Ｙ２７９Ｆ、Ｙ３０４Ｆ和Ｙ５４６Ｆ等４ 种Ｓｙｐ 在胞内均能直接与ＢｃｒＡｂｌ 结合。体外结合实验结果表明Ｙ３０４Ｆ突变导致了Ｓｙｐ 不能与Ｓｈｃ 结合，Ｙ２７９Ｆ突变则导致了Ｓｙｐ 不能与Ｇｒｂ２ 结合。结论是： 作为“接头蛋白，Ｓｙｐ 可以介导ＢｃｒＡｂｌ 与Ｓｈｃ 和Ｇｒｂ２ 之间的结合；Ｇｒｂ２ 结合在Ｓｙｐ 的Ｙ２７９ 上，Ｓｈｃ 则结合在Ｓｙｐ的Ｙ３０４ 上