麋鹿朊蛋白全基因的克隆及序列分析
Cloning and sequencing of PRNP gene from Milu deer in China作者机构:中国动物卫生与流行病学中心山东青岛266032 华南农业大学兽医学院广东广州510642 山东农业大学动物医学院山东泰安271018 青岛农业大学动物科技学院山东青岛266109
出 版 物:《中国兽医科学》 (Chinese Veterinary Science)
年 卷 期:2013年第43卷第2期
页 面:131-135页
核心收录:
学科分类:090601[农学-基础兽医学] 09[农学] 0906[农学-兽医学]
基 金:国家公益性行业(农业)科研专项(200903037)
主 题:麋鹿 朊蛋白全基因 克隆 序列分析 鹿慢性消耗性疾病
摘 要:为获得中国麋鹿朊蛋白(PRNP)的全基因,并利用DNAStar软件与已报道的其他动物的朊蛋白全基因序列进行同源性分析,根据GenBank中马鹿朊蛋白基因序列设计特异性引物,采用PCR方法从提取的总基因组中扩增得到麋鹿PRNP基因;将其连接到pGEM-T Easy载体中,获得克隆产物并测序。结果,成功扩增出了中国麋鹿PRNP基因,构建了重组质粒pGEM-T-ML;对克隆产物的序列分析表明,麋鹿PRNP基因的开放阅读框包含771bp,编码256个氨基酸的前体蛋白,前体蛋白的分子质量约为28 200u;与已报道的其他鹿科动物朊蛋白全基因的核苷酸及氨基酸序列的同源性均在98.8%以上,与几种非鹿科动物的同源性在96.5%~98.4%之间。结果表明,麋鹿PRNP基因的核苷酸和编码蛋白的氨基酸序列与其他鹿科动物的序列具有高度保守性,而与几种非鹿科动物间的同源性也较高,说明朊蛋白是一种古老的高度保守的蛋白。