谷氨酸棒状杆菌葡萄糖代谢阻断工程菌的构建

作     者：韩武洋 刘金雷 杜红燕 王北辰 仪宏 李天明 HAN Wuyang;LIU Jinlei;DU Hongyan;WANG Beichen;YI Hong;LI Tianming

作者机构：河北科技大学生物科学与工程学院河北石家庄050018 威斯康星大学农业与生命学院美国麦迪逊53706 

出 版 物：《食品科学》 (Food Science)

年 卷 期：2017年第38卷第2期

页      面：65-74页

核心收录：

学科分类：0710[理学-生物学] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[理学-遗传学] 0901[农学-作物学] 0836[工学-生物工程] 090102[农学-作物遗传育种] 

基　　金：国家高技术研究发展计划(863计划)项目(2014AA022102) 

主　　题：谷氨酸棒状杆菌 葡萄糖 基因敲除 

摘      要：采用反向代谢工程的策略,以谷氨酸棒杆菌ATCC 13032野生型为出发菌株,利用无抗性标记的同源重组方法,敲除了编码葡萄糖pts系统关键转运蛋白基因ptsG、ptsH-ptsI和葡萄糖转运系统关键转运蛋白基因abc、abc2和iolt1,得到了5株逐次敲除了相应基因的突变株。结果表明:当以葡萄糖为唯一碳源培养时,CGΔptsG菌株的葡萄糖的消耗是野生型的50%,菌体OD值为1.473;CGΔptsH-ptsI菌株的葡萄糖的消耗是野生型的39.5%,菌体OD值为1.226;CGΔabc菌株的葡萄糖的消耗是野生型的36%,菌体OD值为1.092;CGΔabc2菌株的葡萄糖的消耗是野生型的26.2%,菌体OD值为0.486;CGΔiolt1葡萄糖的消耗和菌体生长OD值为0,实现了谷氨酸棒状杆菌葡萄糖代谢的阻断,说明ptsG、ptsH-ptsI、abc、abc2和iolt1所编码的转运蛋白具有葡萄糖转运功能。