一种可同步检测3种外源基因的多重PCR方法

作     者：尹全 李忆 邓强 敬媛 YIN Quan;LI Yi;DENG Qiang;JING Yuan

作者机构：四川省农业科学院分析测试中心四川成都610066 四川民族学院环境与生命科学系四川康定626001 甘孜州农产品质量安全中心四川康定626000 

出 版 物：《山西农业科学》 (Journal of Shanxi Agricultural Sciences)

年 卷 期：2017年第45卷第1期

页      面：37-40,88页

学科分类：0710[理学-生物学] 071010[理学-生物化学与分子生物学] 07[理学] 

基　　金：四川省财政现代农业技术创新与示范专项资金项目(2014CXSF-040) 四川省教育厅自然科学一般项目(15ZB0331) 

主　　题：T-CaMV 35S P-CaMV 35S pat 多重PCR 检测 

摘      要：为建立一种可同步检测3种外源基因的多重PCR方法,试验选择较常见的T-CaMV 35S,P-CaMV 35S和pat这3个基因作为多重PCR检测对象,对多重PCR体系中引物浓度配比和引物退火温度进行优化。结果表明,多重PCR适宜的引物终浓度(μmol/L)配比T-CaMV 35S∶P-CaMV 35S∶pat为0.2∶0.2∶0.2以及适宜的引物退火温度为56℃;采用优化后的反应体系对多重PCR体系灵敏度进行测试,结果显示,方法灵敏度为0.5 ng;通过利用建立的多重PCR方法对已知样品进行检测,结果表明,试验建立的多重PCR体系具有良好的可靠性。