细胞因子信号抑制因子-1沉默联合肿瘤抗原存活素及黏蛋白1负载的新型树突状细胞疫苗体外抗前列腺癌免疫效应

作     者：肖家全 付贤 吴慧峰 余红 Xiao Jiaquan

作者机构：浙江大学医学院附属第二医院泌尿外科杭州310009 浙江大学医学院附属第二医院临床研究中心杭州310009 杭州市第一人民医院泌尿外科310006 

出 版 物：《中华实验外科杂志》 (Chinese Journal of Experimental Surgery)

年 卷 期：2016年第33卷第11期

页      面：2559-2562页

学科分类：1002[医学-临床医学] 10[医学] 

基　　金：浙江省自然科学基金（Y13H050024） 浙江省医药卫生科研基金计划（2011） 

主　　题：细胞因子信号抑制因子-1 存活素 黏蛋白1 前列腺癌 树突状细胞 

摘      要：目的 通过沉默细胞因子信号抑制因子-1（SOCS-1）与负载肿瘤抗原存活素（Survivin）及黏蛋白1（MUC1）联合的方法构建新型树突状细胞（DC）疫苗,观察其体外抗前列腺癌（PCa）的免疫效应.方法 分离健康人外周血单个核细胞,体外诱导培养成DC,再以携有SOCS-1小干扰RNA（siRNA）及Survivin、MUC1融合蛋白的重组人5型腺病毒载体去感染DC（感染复数=1000）.反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）及Western blot法检测感染后DC中SOCS-1、Survivin及MUC1的表达;流式细胞学分析DC表型分子人类白细胞抗原（HLA）-DR、CD83、CD1a、CD80和CD86;混合淋巴细胞反应检测其刺激T淋巴细胞增殖能力;酶联免疫吸附试验检测其分泌白细胞介素-12（IL-12）的水平,然后将DC与T细胞按1∶10比例共培养诱导成细胞毒性T细胞（CTL）,乳酸脱氢酶释放法检测CTL分别在5∶1、10∶1、25∶1、50∶1等效靶比（E/T）下对PCa细胞的体外杀伤活性.结果 腺病毒感染DC效率为80％,感染后DC中SOCS-1表达受到明显抑制,Survivin及MUC1呈显性表达;成熟DC的表型分子HLA-DR、CD83、CD1a、CD80和CD86阳性率分别为（96.20±3.16）％、（75.20±2.63）％、（96.00±2.89）％、（96.80±2.77）％、（92.70±3.03）％,与未成熟DC组比较,表达显著增高,差异有统计学意义（P0.05）.腺病毒感染组、阴性对照感染组及未感染组DC培养上清液中IL-12分泌水平分别为：（124.59±9.56）、（62.30±11.01）、（50.00±8.36） ng/L,可见新型DC疫苗IL-12分泌能力明显增强（P0.05）;其诱导产生的CTL对PCa细胞DU-145的杀伤活性分别为：E/T=5∶1时为（22.56±1.23）％、E/T=10∶1时为（36.98±1.62）％、E/T =25∶1时为（55.40±2.96）％、E/T=50∶1时为（68.72±3.35）％,均明显高于对照组（P0.05）.结论 沉默SOCS-1联合负载Survivin及MUC1的新型DC疫苗可有效诱导体外特异性抗PCa免疫效应.