桔皮素对人肝癌HepG2细胞体外增殖和侵袭的影响及机制研究

作     者：孙志欣 张莹 SUN Zhixin;ZHANG Ying

作者机构：天津中医药大学第一附属医院急症病房天津300193 

出 版 物：《中国药房》 (China Pharmacy)

年 卷 期：2016年第27卷第34期

页      面：4800-4803页

学科分类：1007[医学-药学(可授医学、理学学位)] 1006[医学-中西医结合] 100706[医学-药理学] 100602[医学-中西医结合临床] 10[医学] 

主　　题：桔皮素 人肝癌HepG2细胞 增殖 侵袭 上皮-间质转化 

摘      要：目的：考察桔皮素对人肝癌Hep G2细胞体外增殖和侵袭的影响,并探讨其作用机制。方法：以0（空白对照组）、10、20、40、60、80μmol/L桔皮素分别作用于细胞24、48 h后,采用CCK-8法检测细胞增殖率,并计算其半数抑制浓度（IC50）。以0、20、30μmol/L桔皮素作用细胞48 h后,采用Transwell侵袭实验考察其对细胞侵袭的影响;并分别采用实时荧光定量聚合酶链式反应法和Western blot法考察其对细胞中E-钙黏蛋白（E-cadherin）、N-钙黏蛋白（N-cadherin）、波形蛋白（Vimentin）、Notch-1、免疫细胞表面抗原44（CD44）、基质金属蛋白酶9（MMP-9）m RNA及其蛋白表达的影响;采用Western blot法考察蛋白激酶B（Akt）、糖原合成酶激酶3β（GSK-3β）的磷酸化水平。结果：1080μmol/L桔皮素对人肝癌Hep G2细胞的体外增殖均具有明显的抑制作用,且呈时间和剂量依赖性,增殖率较空白对照组显著降低（P〈0.05）,作用24、48 h后的IC50分别为55.7、23.4μmol/L。20、30μmol/L桔皮素作用48 h后,细胞侵袭能力明显受到抑制;细胞中N-cadherin、Vimentin、Notch-1、CD44和MMP-9 m RNA及其蛋白水平表达明显降低,E-cadherin m RNA及其蛋白表达水平明显升高,且Akt、GSK-3β磷酸化水平升高,较空白对照组差异均有统计学意义（P〈0.05）。结论：桔皮素可抑制人肝癌Hep G2细胞的体外增殖和侵袭;其机制可能与下调细胞中Notch-1表达、抑制细胞的上皮-间质转化而抑制CD44和MMP-9的表达,以及抑制其上游Akt-GSK-3β信号途径有关。