转甲状腺素蛋白对RPE细胞及视网膜微血管内皮细胞生物学行为的影响

作     者：庄淼 邵珺 谭澄烨 姚勇 Zhuang Miao Shao Jun Tan Chengye Yao Yong

作者机构：南京医科大学附属无锡市人民医院眼科214023 

出 版 物：《中华眼科杂志》 (Chinese Journal of Ophthalmology)

年 卷 期：2016年第52卷第11期

页      面：856-860页

核心收录：

学科分类：1002[医学-临床医学] 100212[医学-眼科学] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金(81400415) 江苏省自然科学基金(BK2012540) 

主　　题：前白蛋白 视网膜色素上皮 视网膜血管 内皮细胞 细胞增殖 细胞运动 血管内皮生长因子A 

摘      要：目的 观察转甲状腺素蛋白（TTR）对视网膜色素上皮细胞（RPEC）增生及视网膜微血管内皮细胞（RMVEC）增生、迁移的影响并考察其与VEGF mRNA表达的关系,方法 通过加入外源性TTR考察TTR对RPEC增生的影响;利用小干扰RNA （siRNA）沉默视网膜色素上皮自身表达的TTR,使用Western blot检测沉默效果;RT-PCR法考察沉默后VEGFmRNA的变化;通过transwell共培养体系,观察TTR沉默前后RMVEC增生、迁移行为的改变.两组间比较行t检验,三组间两两比较用SNK法.结果 MTT比色法显示,4μmol/L组吸光度（A）值（0.36±0.01）低于0μmol/L组A值（0.72±0.02）,差异有统计学意义（t=18.08,P0.0001）,TTR对RPEC的增生有抑制作用;Western blot法检测TTR的表达抑制,实验组与对照组间差异有统计学意义（P0.05）,TTR的表达被有效沉默;沉默TTR表达后检测VEGF mRNA表达,空白对照组、阴性对照组、实验组3个组间两两比较,差异均无统计学意义（P0.05）,TTR的沉默表达并未在mRNA水平上引起VEGF的表达改变;48 h RPEC-RMVEC共培养细胞增生实验结果显示,RMVEC增生数NCsiRNA组[（362.8±17.7）个]和TTR siRNA组[（252.4±13.92）个]间差异有统计学意义（t=4.901,P=0.0012）,沉默TTR表达会抑制RMVEC的增生能力.48 hRPEC-RMVEC共培养细胞迁移实验结果显示,RMVEC向外迁移数NCsiRNA组[（229.0±14.9）个]和TTR siRNA组[（147.8±12.2）个]比较,差异有统计学意义（t=4.213,P=0.0029）.沉默TTR表达会抑制RMVEC的迁移能力.结论 TTR能抑制RPEC增生、促进RMVEC增生和迁移,这一现象并非通过VEGF实现,其机制值得进一步研究.