赛庚啶ELISA检测试剂盒的研制及其性能评价

作     者：黄士新 李丹妮 顾欣 黄华 陈亮 王学生 HUANG Shi - xin LI Dan - ni GU Xin HUANG Hua CHEN Liang WANG Xue - sheng

作者机构：上海市动物疫病预防控制中心上海201103 上海容晖生物科技有限公司上海200231 

出 版 物：《中国兽药杂志》 (Chinese Journal of Veterinary Drug)

年 卷 期：2016年第50卷第11期

页      面：44-48页

学科分类：090603[农学-临床兽医学] 09[农学] 0906[农学-兽医学] 

基　　金：国家公益性行业(农业)科研专项(201203023) 上海市科技兴农重点攻关项目[沪农科攻字(2014)第3-3号] 

主　　题：动物尿样 赛庚啶 竞争酶联免疫 单克隆抗体 试剂盒 

摘      要：基于直接竞争法原理酶联免疫技术研制了一种测定动物尿液中赛庚啶(CHP)残留量的检测试剂盒,并对试剂盒的检测限、特异性和稳定性等参数进行确定。通过在CHP分子上引入活性羧基,在EDC作用下分别偶联到KLH、BSA上形成CHP-KLH和CHP-BSA抗原,CHP-KLH抗原免疫BALB/C小鼠制得抗CHP单克隆抗体,经辣根过氧化物酶HRP标记抗CHP抗体,采用CHPBSA抗原包被酶标板,最终成功构建动物尿样中CHP残留量的竞争酶联免疫法检测体系,并进行性能测试评价。结果表明,吸光度百分比值与CHP质量浓度的对数在0.1~1.6μg/L呈线性关系,相关系数R^2为0.986,半数抑制浓度(IC_(50))为0.316μg/L,检测限为0.158μg/L,回收率在80%~110%,变异系数为2.0%~10.0%。方法具备良好的特异性,可用于动物尿样、血清及组织中CHP残留的快速检测。