菜豆荚斑驳病毒外壳蛋白大小亚基的原核表达及其抗血清制备

作     者：陈定虎 刘恭源 郑传发 管维 熊仁广 苏斐 王勇 Chen Dinghu Liu Gongynan Zheng Chuanfa Guan Wei Xiong Renguang Su Fei Wang Yong

作者机构：中山出入境检验检疫局技术中心广东中山528400 

出 版 物：《植物检疫》 (Plant Quarantine)

年 卷 期：2016年第30卷第5期

页      面：49-53页

学科分类：09[农学] 0904[农学-植物保护] 

基　　金：广东出入境检验检疫局项目(2015GDK58) 中山市科技局项目(2014A2FC243) 

主　　题：菜豆荚斑驳病毒 外壳蛋白 大亚基 小亚基 原核表达 抗血清 

摘      要：本研究对菜豆荚斑驳病毒大、小亚基编码的基因密码子进行了优化并人工合成了这两个基因,然后克隆到原核表达载体p ET-22b（＋）中,通过转化大肠杆菌BL21（DE3）菌种并在IPTG的诱导下进行了成功表达,大亚基表达产物分子量为41 k D、小亚基表达产物分子量为22 k D,并制备出了大小亚基基因表达产物的抗血清。测试结果表明,优化后的CP的大、小亚基基因在37℃、1.0 mmol/L IPTG诱导下,3 h后得到了成功的表达,制备的两种抗血清特异性强、效价都达到1∶3.2×10~4,可以对BPMV CP 3个不同的区域同时进行检测,提高了检测的准确度。