牛生长激素cDNA的分子克隆
MOLECULAR CLONING OF BOVINE GROWTH HORMONE cDNA作者机构:中国科学院发育生物学研究所
出 版 物:《生物工程学报》 (Chinese Journal of Biotechnology)
年 卷 期:1988年第1期
页 面:20-25页
学科分类:1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学]
基 金:国家自然科学基金
摘 要:我们克隆了与牛生长激素 Poly(A)+RNA 互补的 DNA(cDNA)。首先从小牛垂体中提纯总的 Poly(A)+RNA,用 AMV 逆转录酶合成单链 cDNA,以单链 cDNA 为模板合成双链cDNA,用多聚 G 及多聚 C 谱尾法将双链 cDNA 克隆到 pBR322质粒的 Pst I位点上,构建成牛垂体 Poly(A)+RNA 的 cDNA 文库。以牛生长激素基因为探针,筛选出7个阳性菌落,经电冰鉴定有两个菌落(1号和2号)含有大于500bp 的插入片段。1号克隆经酶切图谱、Southern blot 杂交及序列分析证实含有牛生长激素的编码序列。