恶性疟原虫3D7株AP核酸内切酶的原核表达及多克隆抗体的制备

作     者：土志伟 赵帅杰 常志广 陆慧君 姜宁 陈启军 TU Zhiwei;ZHAO Shuaijie;CHANG Zhiguang;LU Huijun;JIANG Ning;CHEN Qijun

作者机构：吉林大学人兽共患病研究所长春130062 

出 版 物：《吉林农业大学学报》 (Journal of Jilin Agricultural University)

年 卷 期：2016年第38卷第3期

页      面：346-349,356页

学科分类：090603[农学-临床兽医学] 09[农学] 0906[农学-兽医学] 

基　　金：国家自然科学基金项目(81130033) 

主　　题：恶性疟原虫 AP核酸内切酶 基因克隆 多克隆抗体 药物靶点 

摘      要：为研究恶性疟原虫（Plasmodium falciparum）3D7株AP核酸内切酶（AP endonuclease）的功能,通过PCR的方法扩增PF3D7_0305600（292-1 137 bp）,构建克隆载体。测序正确后,将该片段插入到pET-28a和p GEX-4T-1,构建重组表达载体p ET-28a-Ae、p GEX-4T-1-Ae。将表达载体转入BL21-Codon Plus表达重组蛋白r-Ae-His和r-Ae-GST,经SDS-PAGE和Western blot鉴定,r-Ae-His免疫家兔制备多克隆抗体,并用ELISA检测抗血清效价,Western blot检测抗体特异性。结果表明：表达的r-Ae-His分子量约为39 ku,r-Ae-GST分子量约为60 ku。制备的多克隆抗体能够特异性地识别天然蛋白,可用于恶性疟原虫3D7株AP核酸内切酶的后续研究。