尘螨变应原治疗性产品鉴别试验解吸附方法的建立

作     者：李喆 张影 徐颖华 杨英超 薄淑英 张瑾 辛晓芳 无

作者机构：中国食品药品检定研究院北京100050 

出 版 物：《中国生物制品学杂志》 (Chinese Journal of Biologicals)

年 卷 期：2016年第29卷第9期

页      面：987-989,992页

学科分类：1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 100102[医学-免疫学] 10[医学] 

基　　金：国家高技术研究发展计划(863计划 2012AA02A402) 

主　　题：尘螨 变应原 治疗性产品 鉴别试验 解吸附 

摘      要：目的建立尘螨变应原治疗性产品鉴别试验的解吸附方法。方法选取两个厂家的尘螨变应原治疗性产品,分别用1 ml 20%柠檬酸溶液、0.4 mol/L磷酸盐溶液和0.5 mol/L EDTA-Na溶液解吸附后,进行SDS-PAGE和Western blot鉴别试验。将两个厂家各3批尘螨变应原治疗性产品于常温及37℃下分别解吸附16和24 h,进行Western blot鉴别试验。结果两个厂家的制品经3种溶液解吸附后,SDS-PAGE结果均可见相对分子质量约28 000及15 000的组分Ⅰ丝氨酸蛋白酶和组分ⅡNPC家族蛋白目的条带,Western blot结果可见同样大小的与鼠抗螨变应原组分Ⅰ、Ⅱ单克隆抗体特异性结合的蛋白条带,而未解吸附的制品未检测到以上目的条带。3批制品的Western blot鉴定结果相近,表明两种解吸附温度及时间对鉴别试验的结果影响不大。结论尘螨变应原治疗性产品需经解吸附后才能进行鉴别试验,本研究建立的解吸附方法可有效稳定地对制品进行解吸附。