家蚕微孢子虫水通道蛋白基因NbAQP的克隆及表达特征分析

作     者：王玮 陈功 彭祥然 李孝良 唐旭东 徐莉 沈中元 Wang Wei;Chen Gong;Peng Xiangran;Li Xiaoliang;Tang Xudong;Xu Li;Shen Zhongyuan

作者机构：江苏科技大学江苏镇江212003 中国农业科学院蚕业研究所江苏镇江212018 

出 版 物：《蚕业科学》 (ACTA SERICOLOGICA SINICA)

年 卷 期：2016年第42卷第4期

页      面：662-667页

学科分类：0906[农学-兽医学] 09[农学] 

基　　金：现代农业产业技术体系建设专项(No.CARS-22) 

主　　题：家蚕微孢子虫 水通道蛋白 基因克隆 表达特征 家蚕中肠组织 实时荧光定量PCR 

摘      要：水通道蛋白(aquaporin,AQP)是在动物、植物、微生物细胞膜上发现的能够高选择性透过水分的一类通道蛋白。通过克隆家蚕微孢子虫(Nosema bombycis,Nb)的AQP基因,并分析其表达特征,为研究AQP在Nb孢子侵染宿主细胞时调节孢子内渗透压的作用积累基础信息。依据从Microsporidia DB和MIPModDB数据库比对获得的序列设计引物,以家蚕微孢子虫基因组DNA为模板克隆了NbAQP基因,该基因大小为750 bp,编码蛋白质分子质量为26.66 k D,具有MIP超家族水通道蛋白的保守跨膜结构域。用半定量RT-PCR和实时荧光定量PCR的方法,在Nb孢子感染宿主家蚕的7 d内,家蚕中肠组织中都能检测到NbAQP基因的表达,自感染后2 d开始,NbAQP基因的表达水平开始明显上升,直至感染后7 d达到最高水平。NbAQP基因的高水平表达时相与家蚕添食Nb孢子后中肠组织中成熟Nb孢子大量出现的时间相一致,初步推测NbAQP可能在家蚕微孢子虫成熟孢子发芽时的孢子内渗透压调节中起到重要作用。