dsRNA阻断大鼠骨髓源性神经干细胞Hes5表达的实验研究
Blocking with double-stranded RNA of the expression of Hes5in rat bone marrow-derived neural stem cells作者机构:第一军医大学珠江医院全军神经医学研究所广东广州510282 第一军医大学细胞生物学教研室学广东广州510515
出 版 物:《第一军医大学学报》 (Journal of First Military Medical University)
年 卷 期:2004年第24卷第1期
页 面:35-38,41页
核心收录:
学科分类:1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 10[医学]
基 金:国家自然科学基金(3027049) 军队及广东省科技厅"十五重大项目(01z054)
主 题:dsRNA 大鼠 骨髓源性神经干细胞 Hes5 实验 外源性短双链RNA 基因表达
摘 要:目的 观察外源性短双链RNA(dsRNA)在转录后水平即mRNA水平降低基因表达的效率,并对其影响因素进行初步探讨。方法 将体外分离培养的大鼠骨髓基质细胞,通过由本实验室配制的特殊培养基诱导成神经干细胞,应用人工合成的dsRNA于不同浓度转染神经干细胞,Western bloting检测dsRNA是否能阻断转录因子Hes5的表达,0.5%锥虫蓝法测定各浓度组中培养细胞活力。结果 200、300nmol/L浓度的dsRNA能特异有效地阻断Hes5的表达,而50~200nmol/L浓度的dsRNA有利于干细胞存活。结论 dsRNA能在神经干细胞内启动RNA干扰作用,适宜浓度的dsRNA能在特异有效地阻断内源性基因的表达的同时,最大限度地保持细胞活力。