白介素17对人结肠癌细胞侵袭能力的影响

作     者：陈转鹏 曹杰 杨平 刘振邦 魏建昌 陈华翠 丘旭彬 胡鹤 Chen Zhuanpeng;Cao Jie;Yang Ping;Liu Zhenbang;Wei Jianchang;Chen Huacui;Qiu Xubin;Hu He

作者机构：广州医科大学附属广州市第一人民医院胃肠外科510180 

出 版 物：《中华胃肠外科杂志》 (Chinese Journal of Gastrointestinal Surgery)

年 卷 期：2016年第19卷第6期

页      面：695-701页

核心收录：

学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金（81272556） 广东省科技基金（2010B060900016） 

主　　题：白介素17 结肠肿瘤 信号传导与转录激活因子3 侵袭迁移 

摘      要：目的探讨白介素17（IL-17）对人结肠癌细胞株SW480和LOVO细胞增殖、侵袭和迁移能力的作用，以及可能的机制。方法根据外源性人IL-17是否作用于人结肠癌细胞株SW480和LOVO，分为4组细胞：SW480对照组（SW480细胞）、LOVO对照组（LOVO细胞）、SW480实验组（50μg／LIL-17处理SW480细胞）和LOVO实验组（50μg／LIL-17处理LOVO细胞）。CCK-8法检测各组细胞增殖活性，细胞增殖率（％）=[（A实验组-A空白组）／（A对照组-A空白组）]×100％；Transwel]实验检测各组细胞侵袭和迁移能力，实时定量聚合酶链反应（realtime．PCR）检测各组细胞血管内皮生长因子（VECF）、基质金属蛋白酶9（MMP-9）mRNA的表达，蛋白质印迹（western blot）检测各组细胞信号传导与转录激活因子3（STAT3）、磷酸化STAT3（p-STAT3）、VEGF和MMP-9蛋白的表达，酶联免疫吸附法（ELISA）检测各组细胞上清液中VEGF、MMP-9蛋白的含量。结果培养24h、48h和72h后，实验组SW480细胞的增殖率分别为1．18％±0．07％、1．42％±0．09％和1．62％±0．08％，LOVO细胞的增殖率分别为1．13％±0．02％、1．32％±0．05％和1．73％±0．02％。Transwell实验显示，IL-17作用24h后．SW480实验组和LOVO实验组侵袭细胞个数分别为34．00±0．45和41．60±0．51，多于对照组（分别为4．53±0．14和3．67±0．33），差异有统计学意义（SW480：t=76．026，P=0．001；LOVO：t=-81．580，P=0．005）；SW480实验组和LOVO实验组迁移细胞个数分别为36．40±0．51和46．40±0．68，多于对照组（分别为7．83±0．69和6．67±0．48），差异有统计学意义（SW480：t=-51．542，P=O．003；LOVO：t=-49．265，P=0．005）。实时定量聚合酶链反应结果显示，IL-17作用24h后，SW480实验组细胞VEGF、MMP-9mRNA相对表达量分别为1．53±0．12和2．44±0．23．高于SW480对照组（均为1．00），差异均有统计学意义（VEGF：t=3．211，P=0．027；MMP-9：t=4．306，P=0．025）；LOVO实验组细胞VEGF、MMP-9mRNA相对表达量分别为2．96±0．35和3．38±0．55．高于LOVO对照组（均为1．00），差异均有统计学意义（VEGF：t=3．799，P=0．043；MMP-9：t=5．254，P=0．039）。Western blot实验表明，IL-17作用24h后，SW480实验组STAT3、P—STAT3、VEGF和MMP-9蛋白的相对表达量明显高于对照组（STAT3：t=3．233，P=0．023；p-STAT3：t=3．954，P=0．032；VEGF：t=3．201，P=0．025；MMP-9：t=3．154，P=0．029）；LOVO实验组STAT3、p-STAT3、VECF和MMP-9蛋白的相对表达量明显高于对照组（STAT3：t=3．788，P=0．012：p-STAT3：t=2．662，P=0．040：VEGF：t=4．118，P=0．035；MMP-9：t=4．268，P=0．030）。ELISA实验结果显示，SW480细胞实验组上清液中VEGF和MMP-9的含量分别为5491．41±63．22和21．43±1．35，均高于对照组（分别为4456．32±87．56和18．57±2．44），差异具有统计学意义（VEGF：t=6．993，P=0．037；MMP．9：t=5．587，P=0．040）。LOVO细胞实验组VEGF和MMP-9的含量分别为8631．46±129．59和178．32±3．20．亦高于对照组（分别为8122．38±108．66和163．22±6．89），差异具有统计学意义（VEGF：t=7．013，P=0．044；MMP-9：t=6．762，P=0．043）。结论IL-17能上调SW480和LOVO人结肠癌细胞中STAT3和p-STAT3蛋白的表达，激活STAT3信号转导通路，从而上调VEGF和MMP-9蛋白的表达，增强SW480和LOVO结肠癌细胞的侵袭和迁移能力。