斑节对虾细胞周期蛋白E基因的克隆与表达分析
Molecular cloning and expression analysis of the cyclin E gene from black tiger shrimp Penaeus monodon作者机构:中国水产科学研究院南海水产研究所 上海海洋大学水产与生命学院 农业部南海渔业资源开发利用重点实验室
出 版 物:《中国水产科学》 (Journal of Fishery Sciences of China)
年 卷 期:2014年第21卷第3期
页 面:464-473页
核心收录:
基 金:国家863计划项目(2012AA10A409) 国家自然科学基金项目(40976101)
主 题:斑节对虾 细胞周期蛋白E 克隆 序列分析 基因表达 卵巢发育
摘 要:为了解细胞周期蛋白E(cyclin E)基因在斑节对虾(Penaeus monodon)发育过程中的作用,构建和测序了斑节对虾全组织cDNA文库,获得了斑节对虾细胞周期蛋白(Pmcyclin)E的部分表达序列。通过RACE技术克隆得到1条全长1 706 bp的cDNA序列。Pmcyclin E开放阅读框(ORF)为1 263 bp,编码420个氨基酸。生物信息学分析表明,该氨基酸序列含有周期蛋白家族特有的CYCLIN保守区并含有N-糖基化位点及磷酸化位点。经BLAST同源性分析表明,该基因编码蛋白与红火蚁(Solenopsis invicta)、切叶蜂(Megachile rotundata)等多种节肢动物细胞周期蛋白E有很高的同源性。组织分布分析表明,该基因在斑节对虾精巢、卵巢、肠、脑、肝胰腺、胃和心脏组织中均有表达,其中卵巢中表达量较高,而心脏、胃及肝胰腺中表达量相对较低。分别对蜕皮抑制激素(MIH)注射和眼柄切除的对虾进行表达分析,发现眼柄切除后,Pmcyclin E大量表达,而注射MIH后细胞Pmcyclin E的表达量相对降低。结果表明,细胞cyclin E基因在斑节对虾卵巢发育过程中起重要作用,且眼柄切除对细胞cyclin E的表达具有影响,该结果为进一步探究斑节对虾卵巢的发育机理提供了理论依据。