铜离子对绵羊PrP^C重组蛋白结构转化的影响

作     者：刘美丽 赵德明 周向梅 尹晓敏 LIU Mei-li;ZHAO De-ming;ZHOU Xiang-mei;YIN Xiao-min

作者机构：中国农业大学国家动物海绵状脑病实验室北京100094 

出 版 物：《中国预防兽医学报》 (Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine)

年 卷 期：2007年第29卷第2期

页      面：107-111页

核心收录：

学科分类：090603[农学-临床兽医学] 09[农学] 0906[农学-兽医学] 

基　　金：国家自然科学基金(No.30500371) 973专项基金(2005CB523000) 博士点基金:20050019031 

主　　题：PrP^C CuCl2 圆二色谱 结构转化 

摘      要：为探明铜离子在朊蛋白构象转化中的作用机制,进一步研究构象病发生机制提供基础数据,利用DNA重组技术,绵羊朊病毒蛋白在大肠杆菌BL21(DE3)中高效表达,获得绵羊PrPC重组蛋白(OvPrPC),与氯化铜在体外结合。对CuCl2处理后的蛋白进行圆二色谱(CD)和蛋白酶K(PK)消化试验进行转化调节后蛋白抗性分析。结果表明,OvPrPC分子量为25172.80u,其二级结构主要由α-螺旋构成,含少量β-折叠。经过CuCl2体外调节后,OvPrPC结构中α-螺旋减少,β-折叠增加。而蛋白酶K消化后,CuCl2作用后的蛋白产生了PK抗性。为进一步的神经细胞毒性试验提供了宝贵的材料,进而为探讨构象病发生机理提供有力的科学依据。