颗粒酶B和胱天蛋白酶-3对肌动蛋白水解作用的体外研究(英文)
In vitro Investigation of Actin Cleavage by Apoptotic Proteases,Granzyme B and Caspase-3作者机构:解放军总医院肝胆外科研究所北京100853 香港中文大学解剖系
出 版 物:《生物化学与生物物理进展》 (Progress In Biochemistry and Biophysics)
年 卷 期:2004年第31卷第6期
页 面:561-566页
核心收录:
学科分类:0710[理学-生物学] 071010[理学-生物化学与分子生物学] 081704[工学-应用化学] 07[理学] 08[工学] 0817[工学-化学工程与技术]
主 题:凋亡 肌动蛋白 颗粒酶B 胱天蛋白酶-3 蛋白质水解 免疫印迹分析
摘 要:已知凋亡过程的基本变化之一是细胞骨架的异常 ,后者在某种程度上决定凋亡细胞的形态学特征 .为揭示凋亡相关蛋白酶———颗粒酶B和胱天蛋白酶 3对胞浆型肌动蛋白的水解作用 ,采用成年猕猴脑组织粗提物作为无细胞体系 ,以外源性颗粒酶B触发凋亡途径的终末反应 .经一系列免疫印迹分析发现 :孵育 12h方见 β 肌动蛋白被剪切 ,产生 4 1ku和 15ku水解片段 ,并证明该水解反应为颗粒酶B依赖 ;颗粒酶B活化的内源性胱天蛋白酶 3和重组胱天蛋白酶 3均不能水解脑提取物中的β 肌动蛋白 ,尽管胱天蛋白酶 3可作用于纯化的肌动蛋白 ,产生 15ku片段 .以上结果提示 ,内源性 β 肌动蛋白对凋亡相关蛋白酶 ,尤其胱天蛋白酶 3不敏感 。