miR-155在低氧环境中对间充质干细胞免疫因子表达的调控及其机制研究

作     者：韩潇 白海 尹娇娇 杨柯 韩燕霞 欧剑锋 王存邦 吴涛 Han Xiao;Bai Hai;Yin Jiaojiao;Yang Ke;Han Yanxia;Ou Jianfeng;Wang Cunbang;Wu Tao

作者机构：兰州军区兰州总医院血液科730050 

出 版 物：《中华血液学杂志》 (Chinese Journal of Hematology)

年 卷 期：2016年第37卷第8期

页      面：671-675页

核心收录：

学科分类：1002[医学-临床医学] 1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 100101[医学-人体解剖与组织胚胎学] 10[医学] 

基　　金：甘肃省科技重大专项(1102FKDA005) 

主　　题：间质干细胞 细胞低氧 微RNAs 一氧化氮合酶 乏氧诱导因子1α 

摘      要：目的探讨miR-155在低氧条件下对间充质干细胞（MSC）免疫因子表达的调控以及作用机制。方法通过Lipofectamine^TM 2000转染试剂将miR-155模拟物转染至MSC中，构建miR-155高表达的MSC细胞。在水合氯化钴（CoCl2·6H2O）模拟的化学低氧环境中，用脂多糖（LPS）刺激MSC的免疫作用，采用实时荧光定量PCR方法鉴定其转染效果，并检测IL-6、IL-8、诱导型一氧化氮合酶（iNOS）、TGF-β、低氧诱导因子1α（HIF-1α）mRNA的表达。用流式细胞术检测细胞表面抗原，ELISA法检测上清中IL-6、IL-8、TGF-β及SDF-1α的表达水平，Western blot法检测iNOS、HlF—1α蛋白的表达。结果较阴性对照组，miR-155转染组的IL-6、IL-8表达上调（24．201±1．536对1．802±0．058，P〈0．01；24．406±4．611对7．407±1．553，P〈0．01），iNOS mRNA表达下调（0．151±0．035对32．925±1．632，P〈0．01）。同时，HIF-1α在低氧环境下高表达（45．093±3．371对2．210±0．498，P〈0．01），且低氧miR-155转染组较低氧对照组上调更为显著（102．965±4．449对45．093±3．371，P〈0．01）。低氧miR-155转染组IL-6、IL-8上调较miR-155转染组更加显著（65．670±10．613对24．201±1．536，P〈0．01；35．537±2．285对24．406±4．611，P〈0．01）；miR-155下调iNOS表达（0．235±0.003对0．612±0．043，P〈0．01），低氧条件下更为显著（0．087±0．002对0．235±0．003，P〈0．01）。低miR-155组SDF-1α、TGF—β mRNA表达均上调（5．690±1．655对0．841±0.194，P〈0．01；6．982±1．353对0．632±0．184，P〈0．01），上清中细胞因子SDF-1α表达水平为24．609±2．584对25．359±2．455（P=0．760）；TGF-β表达水平为0．568±0．019对0．345±0．037（P=0．002）。结论低氧条件下，通过上调HIF-1α的表达，从而下调iNOS基因及蛋白，由此促进miR-155正向调控MSC免疫因子的表达。