A型口蹄疫病毒VP1蛋白竞争ELISA检测方法的初步建立

作     者：颜健华 何奇松 蒋家霞 冯淑萍 黄胜斌 胡巧云 易春华 许瑞胜 梁晟 熊毅 

作者机构：广西动物疫病预防控制中心广西南宁530001 桂林市动物疫病预防控制中心广西桂林541002 广西水产畜牧兽医局广西南宁530021 

出 版 物：《西南农业学报》 (Southwest China Journal of Agricultural Sciences)

年 卷 期：2015年第28卷第5期

页      面：2268-2272页

学科分类：090603[农学-临床兽医学] 09[农学] 0906[农学-兽医学] 

基　　金：广西科技攻关项目(桂科攻0779001) 

主　　题：A型口蹄疫病毒 VP1蛋白 竞争ELISA 

摘      要：用纯化的融合蛋白p GEX-6p-1-VP1作为包被抗原,4E12单抗为检测抗体与待检血清竞争固相抗原,建立了单抗竞争ELISA方法来检测口蹄疫A型抗体,并进行了反应条件的优化,确定阴阳临界值。结果表明,抗原最适包被浓度为0.625μg/m L,待检血清稀释度为1∶2,单抗最大稀释度为1∶400,酶标抗体工作浓度为1∶5000,封闭液、待检血清和单抗作用时间分别为60、60、45 min;阴阳性判断抑制率(PI)≥30%为阳性。与液相阻断ELISA检测试剂盒比对,符合率为84.8%。试验表明,建立的单抗竞争ELISA检测方法具有特异性强、稳定性好等优点,可用于口蹄疫A型血清抗体的检测,这为口蹄疫A型免疫抗体水平检测、疫情监控及流行病学调查提供了技术平台。