猪戊型肝炎病毒ORF2蛋白N端主要抗原表位区的原核表达

作     者：冉旭华 闻晓波 王密 李冬野 侯喜林 RAN Xu-hua;WEN Xiao-bo;WANG Mi;LI Dong-ye;HOU Xi-lin

作者机构：黑龙江八一农垦大学动物科技学院预防兽医学省重点实验室大庆163319 

出 版 物：《中国畜牧兽医》 (China Animal Husbandry & Veterinary Medicine)

年 卷 期：2010年第37卷第1期

页      面：51-54页

学科分类：0710[理学-生物学] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[理学-遗传学] 0901[农学-作物学] 0836[工学-生物工程] 090102[农学-作物遗传育种] 

基　　金：黑龙江省教育厅科学技术研究面上项目(11521201) 

主　　题：猪戊型肝炎病毒 ORF2 主要抗原表位区 表达 

摘      要：用原核表达系统表达猪戊型肝炎病毒ORF2蛋白N端的主要抗原表位区。通过对GenBank公布的猪戊型肝炎病毒DQ1株ORF2的氨基酸序列进行分析,确定了其N端抗原性较高的区域,针对此区域设计并合成了1对特异性引物,RT-PCR扩增该区段,并将此片段克隆到原核表达载体pET30a(+)上,命名为pET30a-ORF2N,转化大肠杆菌BL21感受态细胞,1.0 mmol/LIPTG37℃诱导表达。RT-PCR扩增得到424 bp的片段,重组蛋白大小约为21.8 ku,与预期大小相符。West-ern blotting分析结果表明,该蛋白能与阳性血清发生特异性反应,证明该蛋白具有生物学活性。猪戊型肝炎病毒ORF2蛋白N端主要抗原表位区在大肠杆菌中成功表达,具有一定的反应原性,为进一步用其建立诊断方法奠定基础。