脑靶向基因转运免疫脂质体的制备

作     者：赵浩 王任直 王菲 张燕惠 陈星伟 李馨儒 刘艳 李桂林 魏俊吉 冯铭 孔燕国 栗世芳 

作者机构：中国医学科学院北京协和医学院/北京协和医院神经外科北京100730 北京大学药学院药剂学系北京100191 青岛大学医学院附属医院神经外科山东青岛266003 

出 版 物：《药学学报》 (Acta Pharmaceutica Sinica)

年 卷 期：2009年第44卷第11期

页      面：1285-1290页

核心收录：

学科分类：0710[理学-生物学] 1007[医学-药学(可授医学、理学学位)] 1006[医学-中西医结合] 1004[医学-公共卫生与预防医学(可授医学、理学学位)] 1002[医学-临床医学] 1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 10[医学] 100602[医学-中西医结合临床] 

基　　金：国家自然科学基金资助项目(30571901) 

主　　题：免疫脂质体 非病毒载体 血脑屏障 

摘      要：构建一种高效的可以携带外源基因通过静脉注射的方式、透过血脑屏障进入脑内特异性表达目的蛋白的非病毒载体。通过不同比例的配比,对免疫脂质体合成过程中油相种类和油水比例、磷脂和胆固醇比例、旋转蒸发温度、超声温度和时间进行筛选优化,测定免疫脂质体的包封率和抗体偶联率。将包裹LacZ基因的免疫脂质体经尾静脉注射至大鼠体内,通过组织化学染色检测LacZ基因在大鼠体内的表达情况,验证合成的免疫脂质体是否可以转运外源基因跨过血脑屏障进入脑内表达。免疫脂质体合成的最佳比例为磷脂-胆固醇为1∶1;脂药比为100∶1;油相种类为二氯甲烷,油水比例为4∶1;旋转蒸发温度为30℃;超声温度为10℃;超声时间为5min,10%海藻糖可以增加免疫脂质体的稳定性。脂质体的包封率为87.24%,抗体偶联率为69%。将免疫脂质体通过尾静脉注射到大鼠体内后观察到LacZ基因在脑内及周围器官的表达。因此,通过工艺优化可以得到携带外源基因的免疫脂质体,其可以通过静脉系统跨过血脑屏障进入脑内并且表达,为实现颅内疾病的基因治疗奠定了基础。