应用双抗原夹心法检测抗－HCV抗体

作     者：曹诚 李平 石成华 佟义珍 马清钧 

作者机构：军事医学科学院生物工程研究所 

出 版 物：《中华医学检验杂志》 (Chinese Journal of Laboratory Medicine)

年 卷 期：1996年第19卷第4期

页      面：205-207页

核心收录：

学科分类：1004[医学-公共卫生与预防医学(可授医学、理学学位)] 100401[医学-流行病与卫生统计学] 10[医学] 

主　　题：丙型肝炎病毒 ELISA 融合蛋白 抗-HCV抗体 

摘      要：目的建立检测抗－ＨＣＶ抗体的双抗原夹心酶联免疫吸附测定（ＥＬＩＳＡ）方法。方法用基因工程手段，在大肠杆菌中表达ＨＣＶ抗原表位与大肠杆菌噬菌体ＭＳ２ＤＮＡ聚合酶（ＭＳ２－Ｐｏｌ）的融合蛋白，纯化后作为包被抗原，可溶性表达的ＨＣＶ抗原表位与霍乱毒素Ｂ亚基（ＣＴＢ）的融合蛋白经辣根过氧化物酶标记后作为酶结合物，建立双抗原夹心ＥＬＩＳＡ。结果ＭＳ２－Ｐｏｌ融合蛋白在大肠杆菌中得到高效表达并进行了纯化，所建立的双抗原夹心ＥＬＩＳＡ系统用于检测１４份ＨＣＶ阳性血清样品，抗－ＨＣＶ抗体检出率１００％；检测２１份ＨＣＶ阴性血清，没有假阳性结果。ＣＴＢ抗体不干扰反应。结论双抗原夹心法与采用二抗的ＥＬＩＳＡ系统具有相近的灵敏度和更好的特异性。可以避免由于二抗干扰带来的非特异性。