葱蝇冬滞育蛹的全长cDNA文库的构建

作     者：黎万顺 冯国忠 陈斌 何正波 LI Wan-Shun;FENG Guo-Zhong;CHEN Bin;HE Zheng-Bo

作者机构：昆虫与分子生物学研究所重庆高校生物活性物质工程研究中心重庆高校动物生物学重点实验室重庆400047 

出 版 物：《昆虫知识》 (Entomological Knowledge)

年 卷 期：2010年第47卷第1期

页      面：53-58页

核心收录：

学科分类：0710[理学-生物学] 07[理学] 09[农学] 0904[农学-植物保护] 090402[农学-农业昆虫与害虫防治] 

基　　金：国家自然科学基金(No.30870340) 重庆市自然科学基金(No.CSTC2008BB1365)资助 重庆市自然科学基金重点项目(No.CSTC2008BA5030) 

主　　题：葱蝇 冬滞育蛹 全长cDNA文库 SMART技术 

摘      要：葱蝇Delia antiqua(Meigen)具有冬滞育的特性且与黑腹果蝇Drosophila melanogaster近缘。该研究目的在于构建葱蝇冬滞育蛹的全长cDNA文库,为进一步的冬滞育专化基因筛选、克隆、和表达分析奠定基础。利用RNAiso试剂盒提取葱蝇冬滞育蛹的总RNA,采用SMART技术合成全长cDNA,经SfiⅠ酶切消化后,将cDNA克隆到质粒载体pDNR-LIB。经鉴定,原始文库的滴度为2.4×107cfu/mL。随机挑取15个克隆,经PCR快速鉴定,插入片段大小在0.5～3kb之间,平均大小在1kb左右,重组率达100%。结果表明该研究获得高质量的葱蝇冬滞育蛹cDNA文库。