肝癌差异表达基因EEG1的克隆和鉴定

作     者：黄春玲 王效民 张忠英 邱兴峰 刘平果 李岗山 彭友源 Chun-Ling Huang;Xiao-Min Wang;Zhong-Ying Zhang;Xin-Feng Qiu;Ping-Guo Liu;Gang-Shan Li;You-Yuan Peng

作者机构：厦门大学附属中山医院临床检验中心福建省厦门市361004 厦门大学附属中山医院肝胆外科福建省厦门市361004 

出 版 物：《世界华人消化杂志》 (World Chinese Journal of Digestology)

年 卷 期：2008年第16卷第8期

页      面：829-832页

学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

主　　题：差异表达基因 肝癌组织 mRNA差异显示技术 GenBank数据库 克隆 正常肝组织 差异基因片段 RT-PCR 

摘      要：目的:筛选和克隆肝癌和正常肝组织差异表达的基因片段,以探讨肝癌的发病机制.方法:应用mRNA差异显示技术(mRNA-DD),比较肝癌及正常肝组织基因表达的差异,对获得的差异基因片段进行克隆、测序,测序结果提交GenBank数据库中进行同源性分析,并对其中一条有明显差异的基因用半定量RT-PCR分析该基因在正常肝组织及肝癌组织中的表达情况.结果:凝胶扫描显示在500-600 bp处有一条差异片段,差异条带经酶切图谱分析证实重组质粒是目的克隆,将片段测序结果与GenBank数据库进行同源性比较发现该片段与已知基因EEG1高度同源(99%).RT-PCR结果显示在肝癌组织中EEG1 mRNA的表达水平明显低于正常肝癌组织(P=0.001).结论:EEG1基因在肝癌组织中的表达明显低于正常肝组织,提示EEG1基因的表达下调可能与肝癌的发病有关.