凝血酶调节蛋白植物凝集素样片段的原核表达及抗体制备
The expression of the lectin-like domain of thrombomodulin and production of anti-thrombomodulin antibodies作者机构:上海第二医科大学医学检验重点实验室上海200023
出 版 物:《中国免疫学杂志》 (Chinese Journal of Immunology)
年 卷 期:2004年第20卷第10期
页 面:700-703页
核心收录:
学科分类:1002[医学-临床医学] 1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 100102[医学-免疫学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学]
基 金:上海市科学技术发展基金资助项目 (9941190 0 3 )
主 题:凝血酶调节蛋白 原核表达 抗体制备 免疫小鼠 免疫后 加强免疫 抗体特异性 植物凝集素 复性 提取纯化
摘 要:目的 :制备凝血酶调节蛋白 (thrombomodulin ,TM)抗体。方法 :原核表达目的蛋白 ,将表达的融合蛋白纯化后免疫小鼠。以EVC30 4包板的cell ELISA检测抗体滴度 ,用Westernblot和免疫组化鉴定抗体特异性。结果 :目的蛋白在大肠杆菌中大量表达形成包涵体 ,将表达蛋白纯化并复性后免疫小鼠 ,3次免疫后得抗体效价为 1∶4 0 0 0 ,经加强免疫后抗体效价达到1∶80 0 0 ;特异性较好。结论 :在天然TM提取纯化困难的情况下 。