鸡miR-203a的生物信息学分析及其对黑色素沉积作用
作者机构:河南农业大学动物科技学院 河南省鸡种质资源创新与利用重点实验室
出 版 物:《河南农业大学学报》 (Journal of Henan Agricultural University)
年 卷 期:2025年
基 金:国家自然科学基金青年项目(32102540) 河南农业大学青年科技创新基金项目(KJCX2021A09)
主 题:淅川乌骨鸡 miR-203a 进化分析 靶基因 表达分析
摘 要:【目的】探索鸡miRNA-203a在黑色素沉积过程中潜在的作用机制。【方法】通过miRbase数据库获取miRNA-203a的成熟体序列,利用MEGA11软件构建miRNA-203a的系统进化树,采用TargetScan和miRDB在线工具预测鸡miRNA-203a的靶基因,并对其进行GO和KEGG富集分析;利用实时荧光定量PCR(quantitative Real-time polymerase chain reaction,RT-qPCR)检测miRNA-203a在淅川乌骨鸡和固始鸡背肤,以及在淅川乌骨鸡不同组织或器官中的表达量;在黑色素细胞中对miRNA-203a进行过表达和干扰后,利用RT-qPCR检测miR-203a的靶基因丝裂原活化蛋白激酶10基因(mitogen-activated protein kinase 10,MAPK10)的表达水平。【结果】miR-203a在不同物种间高度保守,经系统进化树序列比对分析,鸡miR-203a与斑马鱼的亲缘关系较近,与大鼠和人亲缘关系较远,预测得到鸡miR-203a有150个靶基因。GO功能富集分析表明,miR-203a靶基因主要富集在基因表达调控、生长因子应答和大分子代谢过程调控等过程;KEGG通路富集显示,miR-203a靶基因显著富集于MAPK信号通路、焦点黏附、Wnt信号通路等。miR-203a在固始鸡背肤中的表达量显著高于淅川乌骨鸡;通过淅川乌骨鸡不同组织或器官表达谱分析,miR-203a在背肤中的表达量最高,肾脏和心脏次之,均显著高于肝脏和脾脏。在黑色素细胞中过表达miRNA-203a,靶基因MAPK10表达量显著下降,干扰miR-203a后,MAPK10表达量显著上升。【结论】miR-203a在物种进化过程中高度保守,在黑色素细胞中起负调控作用,可能通过负调控MAPK10基因进而调节MAPK及Wnt等多条信号通路。