金水缓纤方通过p53-KRT8信号通路减轻HPAEPIC细胞衰老和分化障碍改善肺纤维化的作用机制

作     者：王宇 游梦月 余本嫚 陈媛媛 韩瑞婷 沈俊岭 余海滨 

作者机构：河南中医药大学第一附属医院呼吸科 河南中医药大学第一临床医学院 河南中医药大学呼吸疾病中医药防治省部共建协同创新中心河南省中医药防治呼吸病重点实验室 

出 版 物：《海南医学院学报》 (Journal of Hainan Medical University)

年 卷 期：2025年

学科分类：1008[医学-中药学(可授医学、理学学位)] 1006[医学-中西医结合] 100602[医学-中西医结合临床] 10[医学] 

基　　金：国家重点研究计划中医药现代化重点专项(2023YFC3502604) 河南省自然科学基金(222300420221) 河南省中医药研究重大专项(2022ZYZD04) 河南省中医药科学研究专项(2021JDZY102,2023ZXZX1033) 郑州市协同创新中心专项(2023XTCX043) 

主　　题：肺纤维化 衰老 金水缓纤方 KRT8 Ⅱ型肺泡上皮细胞 

摘      要：目的：基于p53-KRT8信号探讨金水缓纤方减轻HPAEPIC细胞衰老和分化障碍改善博来霉素（BLM）诱导的HPAEPIC细胞肺纤维化的作用机制。方法：采用0.63μg/mLBLM诱导HPAEPIC细胞48h构建细胞肺纤维化模型，分为空白组（CON组）、模型组（MOD组）、金水缓纤方组（JHF组、10%）、吡非尼酮组（PFD组、20μg/mL）和p53抑制剂组（Pifithrin-αHBr抑制剂、PFT-α组、10μmol/L）。CCK-8法检测细胞活力；RT-PCR法检测细胞IL-6、IL-8、p21、p53、SPC、KRT8、IL-13 mRNA的表达水平；流式细胞术检测细胞周期；免疫印迹法检测p53、KRT8、CLDN4、N-CAD、α-SMA蛋白表达；免疫荧光法检测p53、p21、KRT8表达。结果：与CON组相比，MOD组G1（%）、G1/G2水平显著下调（P0.01），G2（%）和IL-6、IL-8、p21、p53、KRT8、CLDN4 mRNA表达显著增多（P0.05，P0.01），p53、KRT8、CLDN4、N-CAD、α-SMA蛋白表达显著增多（P0.05，P0.01），p53、p21、KRT8荧光表达均显著增多（P0.01）；与MOD组相比，JHF和PFT-α组G1（%）水平上调（P0.05，P0.01），G2（%）和IL-6、IL-8、p21、p53、KRT8 、CLDN4 mRNA表达显著减少（P0.05，P0.01），p53、KRT8、CLDN4、N-CAD、α-SMA蛋白表达显著减少（P0.05，P0.01），p53、p21、KRT8荧光表达均显著减少（P0.01），各组KRT8荧光与p21荧光的皮尔森系数均0.5。结论：金水缓纤方可以改善BLM诱导的HPAEPIC细胞肺纤维化，其机制可能与抑制p53-KRT8通路，减轻HPAEPIC细胞衰老和分化障碍有关。