碱-酶水解结合分散式固相萃取提高大豆异黄酮活性总量测定的准确性

作     者：顾文 黎晨曼 孙震 庞月红 冯永巍 沈晓芳 GU Wen;LI Chen-man;SUN Zhen;PANG Yue-hong;FENG Yong-wei;SHEN Xiao-fang

作者机构：江南大学食品科学与资源挖掘全国重点实验室江苏无锡214122 无锡市食品安全检验检测中心国家市场监管技术创新中心(特殊食品)江苏无锡214142 

出 版 物：《分析测试学报》 (Journal of Instrumental Analysis)

年 卷 期：2025年第44卷第1期

页      面：106-115页

核心收录：

学科分类：081704[工学-应用化学] 07[理学] 08[工学] 0817[工学-化学工程与技术] 09[农学] 070302[理学-分析化学] 0903[农学-农业资源与环境] 0703[理学-化学] 

基　　金：江苏省市场监督管理局科技计划项目(KJ2024070) 

主　　题：大豆异黄酮 聚酰胺(PA) 分散式固相萃取(d-SPE) β-葡萄糖苷酶 超高效液相色谱(UPLC) 

摘      要：通过碱性甲醇溶液超声提取,结合杏仁来源β-葡萄糖苷酶水解及聚酰胺分散式固相萃取步骤,建立了超高效液相色谱测定大豆异黄酮活性总量的方法。样品中的丙二酰及乙酰类大豆异黄酮苷在碱性条件下水解成基本型苷,并在β-葡萄糖苷酶的作用下进一步脱去糖基转变为相应的苷元。样品中12种不同形式的大豆异黄酮转变为仅含3种大豆异黄酮苷元(大豆苷元、黄豆黄素、染料木素)后,以聚酰胺粉进行分散式固相萃取,C_(18)反相色谱柱(2.1 mm i.d.×50 mm,1.8μm)分离。结果显示,大豆苷元、黄豆黄素及染料木素在3 min内实现基线分离,3种异黄酮苷元的标准曲线相关系数(r^(2))均大于0.999,总异黄酮的回收率为94.3%~102%,相对标准偏差(RSD,n=6)小于5.0%,具有较高的准确度和精密度。该方法通过检测样品中的全部苷元来计算异黄酮总量,有助于降低异黄酮检测在分离度、准确度及检测成本上带来的挑战;考虑异黄酮在体内的转化吸收机制和生理效应,以苷元总量计能更科学地反映实际的异黄酮活性水平,避免因通过苷和苷元的简单加和而造成对异黄酮含量水平的高估。