猪miR-135a-5p预测靶基因APC的鉴定

作     者：陈晨 邓缘 任慧波 朱吉 胡雄贵 蒋思文 彭英林 CHEN Chen;DENG Yuan;REN Hui-bo;ZHU Ji;HU Xiong-gui;JIANG Si-wen;PENG Ying-lin

作者机构：湖南省畜牧兽医研究所长沙410131 华中农业大学动物科技学院武汉430070 

出 版 物：《畜牧兽医学报》 (ACTA VETERINARIA ET ZOOTECHNICA SINICA)

年 卷 期：2015年第46卷第4期

页      面：534-541页

核心收录：

学科分类：0905[农学-畜牧学] 09[农学] 

基　　金：湖南省科技计划项目(2014NK3036) 国家自然科学基金(31401097) 

主　　题：猪 miR-135a-5p APC 靶标 

摘      要：本研究旨在鉴定猪miR-135a-5p靶向脂肪发育的相关基因。首先,利用生物信息学软件分析发现,结肠腺瘤性息肉病(APC)基因的3′非翻译区(3′UTR)具有两个与猪miR-135a-5p结合的潜在位点。其次,构建APC基因野生型(APC3′UTR)和突变型(APC3′UTR m1、APC3′UTR m2、APC3′UTR m3)3′UTR双荧光素酶载体,并分别将其与miR-135a-5p mimics、阴性对照(NC)共转染PK-15细胞后检测荧光活性。结果显示:miR-135a-5p mimics显著降低APC3′UTR和APC3′UTR m2载体的荧光活性(P0.05),而APC3′UTR m1和APC3′UTR m3载体的荧光活性得到完全恢复,表明miR-135a-5p主要结合在预测的第一个位点。进一步的分析表明,miR-135a-5p抑制猪前体脂肪细胞内源APC基因的mRNA和蛋白质表达水平。研究结果证实,猪miR-135a-5p靶向APC基因,且调控其表达。本试验为深入研究猪miR-135a-5p的生物学功能及其调控脂肪形成的作用机制提供了基础。