瞬时转染金属硫蛋白-3基因后人神经母细胞瘤细胞系SH-SY5Y细胞的蛋白质差异表达(英文)

作     者：周波 杨伟 纪建国 茹炳根 ZHOU Bo, YANG Wei, JI Jian-Guo *, RU Bing-Gen * ( Proteome Group, National Laboratory of Protein Engineering, College of Life Sciences, Peking University, Beijing 100871, China )

作者机构：北京大学生命科学学院蛋白质工程国家实验室蛋白质组学研究小组 北京大学生命科学学院蛋白质工程国家实验室蛋白质组学研究小组 北京100871 

出 版 物：《生物化学与生物物理学报》 (Acta Biochimica Et Biophysica Sinica)

年 卷 期：2003年第35卷第6期

页      面：522-528页

核心收录：

学科分类：0710[理学-生物学] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[理学-遗传学] 0901[农学-作物学] 0836[工学-生物工程] 090102[农学-作物遗传育种] 

主　　题：金属硫蛋白-3 细胞转染 双向电泳 基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱 

摘      要：金属硫蛋白 3(MT 3) ,又称神经生长抑制因子 ,主要表达于中枢神经系统。它属于金属硫蛋白家族 ,但具有几项其他家族蛋白质如MT 1/ 2等所不具有的独特性质 ,是一种多功能蛋白质 ,可在中枢神经系统中发挥重要的神经调节和神经保护作用 ,但是具体发挥机制还很不清楚。实验以人神经母细胞瘤细胞系SH SY5Y为模型 ,运用最近发展起来的比较蛋白质组学研究方法对MT 3基因瞬时转染引起的SH SY5Y细胞蛋白质的整体变化进行了系统的研究。经考马斯亮蓝染色 ,结果表明 ,MT 3转基因后平均每块胶上可检测到约 75 0个蛋白质点。利用ImageMaster 2DElite软件对胶上的蛋白质点进行半定量分析 ,发现共有 17个蛋白质点呈显著的变化 :和对照组比较 ,在这 17个点中 ,有 12个表达明显上调 ,有 5个表达水平明显下降 ,实验结果具有可重复性。结合pI值和分子量 ,应用基质辅助激光解吸 /电离飞行时间质谱对这 17个点进行分析 ,鉴定了其中 10个点 ,包括类锌指蛋白 ,谷氨酸转运蛋白和增强蛋白等。这些蛋白质都可在神经系统功能的调节中发挥作用。实验结果表明MT 3可能是通过调节和 /或协同这些蛋白质来发挥它的多种功能的。