MUC1 mRNA体外负载树突状细胞诱导细胞毒性T细胞对非小细胞肺癌的杀伤作用

作     者：巴俊慧 吴本权 王艳红 刘慧 杨洋 石云锋 罗进梅 张天托 BA Jun-hui;WU Ben-quan;WANG Yan-hong;LIU Hui;YANG Yang;SHI Yun-feng;LUO Jin-mei;ZHANG Tian-tuo

作者机构：中山大学附属第三医院呼吸内科广东广州510630 中山大学附属第三医院内科ICU广东广州510630 

出 版 物：《中国病理生理杂志》 (Chinese Journal of Pathophysiology)

年 卷 期：2014年第30卷第9期

页      面：1574-1579页

核心收录：

学科分类：1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 100102[医学-免疫学] 10[医学] 

基　　金：广东省科技计划(No.2011B061300009) 国家自然科学基金资助项目(No.81170004) 国家自然科学青年基金资助项目(No.81000986) 

主　　题：树突状细胞 黏蛋白1 电转染 抗肿瘤免疫 肺肿瘤 

摘      要：目的:将体外扩增的黏蛋白1(MUC1)mRNA转染入成熟的树突状细胞(DCs),观察其体外诱导的特异性抗肿瘤效应。方法:将分离提纯的单核细胞培养诱导为DC并用流式细胞术鉴定。构建pcDNA3.1(+)-MUC1质粒,体外转录为mRNA,电穿孔法转染DCs。定量PCR检测转染的DCs中MUC1的表达;MTT法检测T细胞增殖情况;流式细胞术检测CD8+在T细胞的表达;LDH释放法测定细胞毒性,ELISA检测IFN-γ分泌水平。结果:流式细胞术结果表明成熟DCs标志表型的表达明显高于对照组。定量PCR结果说明转染后的DCs MUC1 mRNA相对表达量增高。转染组DCs与T细胞按1∶10共培养时,刺激增殖能力明显高于未转染组,且CD8+T细胞表达率高于未转染组,诱导产生特异性的细胞毒性T细胞杀伤表达MUC1蛋白的靶细胞,而未转染组的杀伤作用较弱。转染组DCs与T细胞共培养的上清中IFN-γ的分泌水平高于未转染组。结论:电穿孔法可以将MUC1 mRNA成功转染至DCs,产生特异性杀伤效应,为以MUC1为靶点的非小细胞肺癌的免疫治疗提供实验和理论依据。