肝细胞生长因子基因转染缺氧培养骨髓间充质干细胞凋亡相关蛋白的影响

作     者：蔡文钦 王隽苼 苏津自 江金峰 姚月娴 Cai Wen-qin;Wang Jun-sheng;Su Jin-zi;Jiang Jin-feng;Yao Yue-xian

作者机构：福建医科大学附属第一医院心内科高血压研究所福建省福州市350005 福建省立医院北院福建省老年医院心内科福建省福州市350003 

出 版 物：《中国组织工程研究》 (Chinese Journal of Tissue Engineering Research)

年 卷 期：2015年第19卷第36期

页      面：5746-5752页

学科分类：0710[理学-生物学] 0831[工学-生物医学工程（可授工学、理学、医学学位）] 1007[医学-药学(可授医学、理学学位)] 0403[教育学-体育学] 1002[医学-临床医学] 07[理学] 1010[医学-医学技术（可授医学、理学学位）] 071007[理学-遗传学] 0703[理学-化学] 0836[工学-生物工程] 

基　　金：福建省卫生厅青年基金(2011-1-32,2011-1-15) 福建省自然科学基金(2014J01433)~~ 

主　　题：干细胞 骨髓干细胞 骨髓间充质干细胞 凋亡蛋白 缺氧培养 细胞迁移 福建省自然科学基金 

摘      要：背景:研究已证实肝细胞生长因子基因转染可提高骨髓间充质干细胞移植效果,但其具体机制尚未完全明确。目的:探讨肝细胞生长因子基因转染对缺氧、无血清培养骨髓间充质干细胞c-Met、Bax、Bcl-2、Caspase-3表达及细胞迁移的影响。方法:1贴壁法体外分离、扩增培养骨髓间充质干细胞。用x-gal染色法检测含肝细胞生长因子基因的重组腺病毒对骨髓间充质干细胞的感染率。2在缺氧、无血清条件下培养0,3,6,9,12 h,采用RT-PCR及Western blot测定骨髓间充质干细胞Bax、Bcl-2、Caspase-3的表达。3骨髓间充质干细胞缺氧、无血清培养6 h,采用RT-PCR及Western blot测定HGF、c-Met、Bax、Bcl-2、Caspase-3的表达。4细胞迁移划痕法观察缺氧、无血清培养6 h后肝细胞生长因子转染对骨髓间充质干细胞迁移的影响。结果与结论:1重组腺病毒对骨髓间充质干细胞的转染率与病毒感染复数具有量效关系,病毒感染复数为150时细胞的感染率达96.4%。2随着缺氧时间的延长骨髓间充质干细胞Bax、Bcl-2表达逐渐升高(P0.05)。4Ad-HGF组骨髓间充质干细胞在缺氧培养6 h后,迁移率比对照组及空载体组高(P0.05)。结果表明肝细胞生长因子基因转染上调缺氧、无血清培养骨髓间充质干细胞c-Met、Bcl-2表达,下调Bax、Caspase-3表达,增强骨髓间充质干细胞迁移能力。