成人宫颈上皮细胞的原代培养及影响因素

作     者：江静 邓齐 马营营 赵昕 刘淳 

作者机构：河北医科大学第二医院妇产科河北石家庄050000 

出 版 物：《中国妇幼保健》 (Maternal and Child Health Care of China)

年 卷 期：2014年第29卷第10期

页      面：1495-1497页

学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金〔81101974〕 

主　　题：原代培养 宫颈上皮细胞 无血清培养基 

摘      要：目的：探讨采用无血清培养基（Ker—SFM）原代培养成人宫颈上皮细胞的效果和影响因素。方法：取65例因子宫良性病变切除子宫患者的宫颈组织，采用diapaselI和胰蛋白酶一EDTA消化法获得宫颈上皮细胞悬液，于上皮细胞专用Ker—SFM中培养，采用免疫细胞化学法测定细胞中E一钙黏蛋白（E—cadherin）及波形蛋白（vimentin）的表达，对细胞纯度进行鉴定，并用透射电镜及扫描电镜观察细胞形态。结果：培养成功率69．23％（45／65），原代培养12～15天细胞生长达80％以上，早期细胞生长状态良好，传代至3代，细胞出现生长衰退。细胞鉴定E—cadherin阳性，vimentin染色阴性，电镜观察细胞符合上皮细胞特点。影响培养成功率的因素主要包括患者年龄大小、取材处组织有无损伤、子宫离体时间、术前是否有阴道或宫颈炎症以及培养基的选择。结论：采用酶消化法及Ker—SFM培养可获得纯度较高的成人宫颈上皮细胞，可作为宫颈癌基础研究的实验模型。