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植物源无血清培养基的研究进展

科技视界 2024年第1期14卷 38-41页

作者：张凯茵王桃兰吴晓俊涂紫薇沈天舒南京财经大学食品科学与工程学院/江苏省现代粮食流通与安全协同创新中心江苏南京210023

在培养基中添加血清是目前培养哺乳动物细胞最常见的方法,血清几乎可以提供细胞生长的一切营养物质,但同时,血清成分复杂,价格昂贵,会增大变异和宿主动物病原体感染的风险,导致细胞污染。而在培养基中添加植物源蛋白水解物代替血清,不... 详细信息

在培养基中添加血清是目前培养哺乳动物细胞最常见的方法,血清几乎可以提供细胞生长的一切营养物质,但同时,血清成分复杂,价格昂贵,会增大变异和宿主动物病原体感染的风险,导致细胞污染。而在培养基中添加植物源蛋白水解物代替血清,不仅能避免它带来的外源性污染缺陷,还能获得良好的细胞培养效果并维持其原有生物学功能,大大提高生物安全性,降低细胞培养成本。综述了植物源无血清培养基的研究现状,阐述了现有研究的问题和未来研究的潜在方向,为后续植物源无血清培养基的开发提供理论指导。

关键词：无血清培养基植物源蛋白水解物细胞培养

无血清培养基IVD101和G1/G2在牛体细胞核移植中的应用研究

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畜牧兽医学报 2008年第11期39卷 1487-1492页

作者：李荣刘颖赵兴波王莉莉王海萍丁方荣李京李松高凤磊戴蕴平中国农业大学动物科技学院北京100193 北京济普霖生物技术有限公司北京100193 中国农业大学农业生物技术国家重点实验室北京100193

通过考察牛体细胞核移植重构胚在无血清培养基(IVD101、G1/G2)条件下培养的囊胚发育率及其质量,从而评估无血清培养基支持牛体细胞核移植重构胚体外发育的能力。采用IVD101和G1/G2对牛体细胞核移植胚胎进行体外培养,并以CR1aa+5%FBS作... 详细信息

通过考察牛体细胞核移植重构胚在无血清培养基(IVD101、G1/G2)条件下培养的囊胚发育率及其质量,从而评估无血清培养基支持牛体细胞核移植重构胚体外发育的能力。采用IVD101和G1/G2对牛体细胞核移植胚胎进行体外培养,并以CR1aa+5%FBS作为对照组。无血清培养基IVD101和G1/G2的囊胚发育率与对照组无显著性差异(41.2%±9.1%、42.2%±10.8%,48.0%±9.2%,P>0.05)。通过囊胚差异染色和冷冻/解冻胚胎存活率分析胚胎质量,发现无血清培养基ICM/Total略低于对照组(31.8%±10.5%、29.5%±11.9%vs.33.0%±14.8%),但无显著性差异(P>0.05);3个组别的囊胚经程序化冷冻/解冻后无血清培养基的存活率(IVD101、G1/G2)略高于对照组,但差异不显著(84.8%、80.4%vs.77.3%,P>0.05)。结果证明无血清培养基(IVD101、G1/G2)可以支持体细胞核移植重构胚的体外发育,且其对程序化冷冻的耐受性与添加血清组(CR1aa+5%FBS)相似。

关键词：无血清培养基体细胞核移植差异染色胚胎冷冻

基于单纯型设计和部件搜索方法的CHO细胞无血清培养基的高通量优化

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高校化学工程学报 2014年第4期28卷 777-783页

作者：李晓璐范里赵亮陈飞谭文松华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室上海200237

氨基酸的浓度与配比对细胞生长和产物表达有重要作用。在自主研发无血清培养基的基础上,通过单纯型格子实验设计优化氨基酸浓度及配比后发现,优化的无血清培养基明显促进了细胞生长。生物反应器批式培养中,最高活细胞密度达52.6×105 ce... 详细信息

氨基酸的浓度与配比对细胞生长和产物表达有重要作用。在自主研发无血清培养基的基础上,通过单纯型格子实验设计优化氨基酸浓度及配比后发现,优化的无血清培养基明显促进了细胞生长。生物反应器批式培养中,最高活细胞密度达52.6×105 cells·mL-1,抗体融合蛋白产量52.2 mg·L-1,相对于商业培养基Ex-cell 302,分别提高了26.7%和11.5%。在此基础上,通过部件搜索的方法确认具有显著正影响的氨基酸为谷氨酰胺、脯氨酸和甲硫氨酸。基于上述研究工作,在2 L反应器采用自主研发的优化无血清培养基,以葡萄糖为关键控制参数,进行两阶段动态流加培养过程,CHO细胞最大活细胞密度达94.6×105 cells·mL-1,抗体融合蛋白终产量600 mg·L-1,相对于商业培养基Ex-cell 302批式培养,分别提高了2.75倍和11.8倍。本研究工作为抗体融合蛋白的高效工业化生产奠定了基础。

关键词： CHO细胞无血清培养基高通量筛选技术氨基酸优化

在无血清培养基中代谢副产物对杂交瘤细胞生长代谢的影响 III.丙氨酸的作用

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华东理工大学学报（自然科学版） 2002年第2期28卷 357-359,379页

作者：张立张元兴华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室上海200237

研究了无血清培养中的代谢副产物丙氨酸对杂交瘤细胞生长代谢的影响。丙氨酸浓度在0～ 8.9mmol/L范围时 ,丙氨酸对细胞生长影响不大 ,对单抗的生成没有直接影响 ,但对细胞代谢有较大的影响。随着丙氨酸浓度的提高 ,葡萄糖的消耗增加 ;同... 详细信息

研究了无血清培养中的代谢副产物丙氨酸对杂交瘤细胞生长代谢的影响。丙氨酸浓度在0～ 8.9mmol/L范围时 ,丙氨酸对细胞生长影响不大 ,对单抗的生成没有直接影响 ,但对细胞代谢有较大的影响。随着丙氨酸浓度的提高 ,葡萄糖的消耗增加 ;同时 ,乳酸的生成增加。

关键词：无血清培养基代谢副产物杂交瘤细胞细胞培养丙氨酸细胞生长细胞代谢

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无血清培养基分离肿瘤干细胞的研究进展

中国生物制品学杂志 2016年第7期29卷 774-777页

作者：董慧君鲁菲张哲曾宪卓郭明辉深圳爱生再生医学科技有限公司广东深圳518057

肿瘤干细胞(cancer stem cells,CSCs)被认为是肿瘤形成、生长、转移以及复发的根本原因。CSCs的分离、鉴定为CSCs的研究及靶向CSCs疗法的开发奠定了基础。目前,无血清培养法已经是分离培养CSCs的常用方法。本文对无血清培养基(serum fre... 详细信息

肿瘤干细胞(cancer stem cells,CSCs)被认为是肿瘤形成、生长、转移以及复发的根本原因。CSCs的分离、鉴定为CSCs的研究及靶向CSCs疗法的开发奠定了基础。目前,无血清培养法已经是分离培养CSCs的常用方法。本文对无血清培养基(serum free medium,SFM)分离CSCs的研究进展作一综述。

关键词：肿瘤干细胞无血清培养基

无血清培养基培养Vero细胞制备狂犬病病毒工艺的建立

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中国生物制品学杂志 2016年第10期29卷 1099-1103页

作者：孙燕张香玲陈军刘鹏马超张生琰李薇兰州生物制品研究所有限责任公司甘肃兰州730046

目的建立无血清培养基(virus production-serum-free medium,VP-SFM)培养Vero细胞制备狂犬病病毒CTN-1V株的工艺。方法分别采用VP-SFM和含5%牛血清DMEM于方瓶中培养Vero细胞制备狂犬病病毒CTN-1V株,比较无血清培养基培养不同代次Vero细... 详细信息

目的建立无血清培养基(virus production-serum-free medium,VP-SFM)培养Vero细胞制备狂犬病病毒CTN-1V株的工艺。方法分别采用VP-SFM和含5%牛血清DMEM于方瓶中培养Vero细胞制备狂犬病病毒CTN-1V株,比较无血清培养基培养不同代次Vero细胞间及无血清与含血清培养基培养Vero细胞间制备的狂犬病病毒滴度及效力。将2 g/L微载体cytodex-1加至250 ml spinner flask中,加入Vero细胞,37℃培养3 d,按MOI=0.02接种狂犬病病毒CTN-1V株,检测病毒收获液的病毒滴度及效力,每天显微镜下观察细胞生长情况,计算细胞比生长速率。结果无血清培养基培养不同代次Vero细胞制备狂犬病病毒的滴度和效力差异无统计学意义(P>0.05);无血清和含血清培养基培养Vero细胞制备狂犬病病毒的滴度差异无统计学意义(P>0.05),但无血清培养基培养Vero细胞制备狂犬病病毒效力明显高于含血清的培养基(P培养Vero细胞制备狂犬病病毒,细胞贴壁均匀,生长良好,收获病毒液的平均病毒滴度为6.50 lg FFU/ml,平均病毒效力为6.77 IU/ml。结论初步建立了微载体系统无血清培养Vero细胞制备狂犬病病毒的工艺,为无血清规模化制备狂犬病疫苗奠定了基础。

关键词：无血清培养基 Vero细胞狂犬病病毒 CTN-1V株

无血清培养基中蛋白类补充因子重组生产研究进展

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药物生物技术 2014年第2期21卷 162-165页

作者：宗超黄磊蔡谨徐志南浙江大学化学工程与生物工程学系浙江杭州310027

鉴于用于动物细胞培养的血清培养基存在诸多缺陷,无血清培养基已成为动物细胞培养的主要培养基。无血清培养基主要由基本培养基和补充因子组成,补充因子包括结合蛋白、贴壁因子、生长激素、生长因子和微量元素等。尽管无血清培养基已经... 详细信息

鉴于用于动物细胞培养的血清培养基存在诸多缺陷,无血清培养基已成为动物细胞培养的主要培养基。无血清培养基主要由基本培养基和补充因子组成,补充因子包括结合蛋白、贴壁因子、生长激素、生长因子和微量元素等。尽管无血清培养基已经在动物细胞培养和蛋白类药物生产中广泛使用,但其中最重要的蛋白类补充因子的研究进展并没有得到很好总结。文章系统总结了各类蛋白补充因子在无血清培养基中的生理功能和相关的重组生产方面的最新研究进展,对蛋白类补充因子高效生产和高质量无血清培养基的规模化制备具有借鉴意义。

关键词：无血清培养基动物细胞培养补充因子基因表达重组蛋白质生长因子

CHO工程细胞(11G-S)悬浮培养的无血清培养基的设计

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生物工程学报 2010年第8期26卷 1116-1122页

作者：刘兴茂刘红叶玲玲李世崇吴本传王海涛谢靖陈昭烈军事医学科学院生物工程研究所北京100071

以悬浮适应的表达重组尿激酶原(Pro-urokinase,pro-UK)CHO工程细胞系11G-S为对象,采用Plackett-Burman实验设计及响应面分析法,设计支持CHO工程细胞(11G-S)悬浮生长的无血清培养基。以细胞密度为评价指标,在单因素实验的基础上采用Plack... 详细信息

以悬浮适应的表达重组尿激酶原(Pro-urokinase,pro-UK)CHO工程细胞系11G-S为对象,采用Plackett-Burman实验设计及响应面分析法,设计支持CHO工程细胞(11G-S)悬浮生长的无血清培养基。以细胞密度为评价指标,在单因素实验的基础上采用Plackett-Burman实验设计对影响细胞生长的培养基添加成分进行考察,确定了3种对细胞生长明显促进作用的培养基添加成分:胰岛素、转铁蛋白及腐胺。继而利用响应面法分析了这3种添加成分的最佳水平范围,设计了一种适用于CHO工程细胞(11G-S)悬浮培养的无血清培养基SFM-CHO-S。11G-S细胞在SFM-CHO-S批次悬浮培养的细胞最大生长密度达到4.12×106cells/mL,pro-UK的最大累积活性达到5614IU/mL,培养效果优于商品化的同类无血清培养基。

关键词： CHO工程细胞悬浮培养无血清培养基实验设计

无血清培养基与完全培养基体外诱导扩增CIK细胞分泌细胞因子水平的比较

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肿瘤防治研究 2006年第11期33卷 784-787页

作者：蒋永新李高峰王熙才金从国李佳陈晓群李明伍治平昆明医学院第三附属医院(云南省肿瘤医院)肿瘤研究所 650118

目的比较无血清培养基（AIMV）与完全培养基（CM）体外诱导扩增CIK细胞及CIK细胞分泌细胞因子水平。方法分别用AIMV及完全培养基加入4种细胞因子（IFN-γ、IL2、IL-1及OKT3）将脐带血单个核细胞（CBMNCs）诱导成CIK细胞，比较细胞的增... 详细信息

目的比较无血清培养基（AIMV）与完全培养基（CM）体外诱导扩增CIK细胞及CIK细胞分泌细胞因子水平。方法分别用AIMV及完全培养基加入4种细胞因子（IFN-γ、IL2、IL-1及OKT3）将脐带血单个核细胞（CBMNCs）诱导成CIK细胞，比较细胞的增殖能力、细胞表型及分泌细胞因子水平。结果与完全培养基比较，无血清培养基培养的CIK细胞增殖高峰较晚（14～17天），但增殖倍数高，在细胞表型、分泌细胞因子水平方面两种培养基培养的CIK细胞均无明显的差别（P〉0．05）。结论无血清培养基可代替完全培养基。

关键词：无血清培养基免疫细胞培养细胞因子肿瘤