聚乙二醇修饰重组人干扰素-α1b条件的优化
Optimization of Condition for Modification of Recombinant Human Interferon-α1b with Polyethylene Glycol作者机构:上海生物制品研究所第一研究室上海200052 华东师范大学生命科学学院上海200052
出 版 物:《中国生物制品学杂志》 (Chinese Journal of Biologicals)
年 卷 期:2008年第21卷第4期
页 面:329-332页
核心收录:
学科分类:1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 100102[医学-免疫学] 10[医学]
基 金:国家863计划专题课题(2007AA02Z100) 上海市科委重点攻关计划(054319924)
主 题:聚乙二醇 重组人干扰素-α1b 化学修饰 优化
摘 要:目的对聚乙二醇(PEG)衍生物化学修饰重组人干扰素-α1b(rhIFN-α1b)的条件进行优化。方法以3种不同的第2代PEG衍生物对rhIFN-α1b进行修饰,SDS-PAGE分析PEG及修饰产物的表观相对分子质量。对反应pH值、温度、时间、修饰剂用量等修饰条件进行优化,并对修饰产物进行初步分离纯化和活性检测。结果PEG的电泳表观相对分子质量大于其理论值;PEG20000的修饰率(92.1%)高于PEG5000和PEG10000;修饰剂用量和pH值是主要影响因素,最佳pH为9.0,rhIFN-αlb与PEG20000的最佳摩尔比为1∶10,时间和温度影响甚微。单点修饰产物保留了14.4%的体外活性,多点修饰产物无活性。结论选择了合适的PEG衍生物并优化了修饰条件,为进一步深入研究奠定了基础。