原薯蓣皂苷体外抗产NDM-1耐碳青霉烯Raoultella ornithinolytica B1645-1B的机制研究

作     者：余春芳 严廷苇 妥娟 彭紫晶 张思涵 胡景秀 何浩 张涵肃 孟丽雪 YU Chun-fang;YAN Ting-wei;TUO Juan;PENG Zi-jing;ZHANG Si-han;HU Jing-xiu;HE hao;ZHANG Han-su;MENG Li-xue

作者机构：湖北医药学院基础医学院 武当特色中药研究湖北省重点实验室 湖北医药学院药护学院 湖北医药学院第一临床学院 湖北医药学院第二临床学院湖北十堰442000 

出 版 物：《湖北医药学院学报》 (Journal of Hubei University of Medicine)

年 卷 期：2024年第43卷第5期

页      面：463-469页

学科分类：1008[医学-中药学(可授医学、理学学位)] 1006[医学-中西医结合] 100602[医学-中西医结合临床] 10[医学] 

基　　金：湖北省教育厅自然科学基金(2023AFB270) 湖北省大学生创新创业训练计划项目(S202213249002) 十堰市科技局项目(22Y23,22Y21) 

主　　题：原薯蓣皂苷 耐碳青霉烯解鸟氨酸乌拉尔菌 NDM-1 亚胺培南 体外抑菌实验 

摘      要：目的:研究原薯蓣皂苷(protodioscin,PD)对产碳青霉烯酶NDM-1解鸟氨酸乌拉尔菌(carbapenem-re⁃sistant Raoultella ornithinolytica)B1645-1B的体外抑菌作用及逆转耐药性机制研究。方法:采用微量肉汤稀释法测定PD对B1645-1B的最低抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC)。应用棋盘法测定中药单体PD联合亚胺培南(Imipenem,IMP)对B1645-1B的MIC,计算抑菌浓度指数(fractional inhibitory concentration,FIC)。采用实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qRT-PCR)检测PD作用菌株B1645-1B后NDM-1 mRNA合成。利用MOE(Molecular Operating Environment)软件预测PD与NDM-1蛋白分子对接。通过十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)检测PD作用纯化后菌株B1645-1B的NDM-1蛋白表达。结果:PD对B1645-1B的MIC为10000μg/mL。PD联合IMP对B1645-1B的FIC为0.75,出现协同作用。PD作用后菌株B1645-1B的NDM-1 mRNA合成抑制和酶活性降低。结论:PD可能是一种很有前途的新型有效的协同抗菌剂及NDM-1酶抑制剂。