不同年龄大鼠骨髓源性心肌干细胞生物学特性的比较

作     者：王存 谭玉珍 王海杰 国海东 张大勇 崔晓军 WANG Cun;TAN Yu-zhen;WANG Hai-jie;GUO Hai-dong;ZHANG Da-yong;CUI Xiao-jun

作者机构：复旦大学上海医学院人体解剖学与组织胚胎学系 

出 版 物：《解剖学报》 (Acta Anatomica Sinica)

年 卷 期：2009年第40卷第4期

页      面：573-579页

核心收录：

学科分类：0710[理学-生物学] 0831[工学-生物医学工程（可授工学、理学、医学学位）] 1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 07[理学] 08[工学] 1010[医学-医学技术（可授医学、理学学位）] 071009[理学-细胞生物学] 09[农学] 0703[理学-化学] 0901[农学-作物学] 0836[工学-生物工程] 090102[农学-作物遗传育种] 

基　　金：国家自然科学基金资助项目(30470883) 高等学校博士点专项科研基金(200802460044) 

主　　题：骨髓源性心肌干细胞 衰老 骨形态发生蛋白-2 细胞分化 β-半乳糖苷酶 活性氧 流式细胞术 

摘      要：目的研究不同年龄大鼠骨髓源性心肌干细胞（MCSCs）形态和衰老相关指标的差异,探讨年龄因素对MCSCs增殖、存活和向心肌细胞分化的影响。方法利用单细胞克隆培养技术从幼年、成年和老年雄性SD大鼠骨髓中筛选MCSCs,透射电镜下观察细胞超微结构改变。SA-β-半乳糖苷酶染色和活性氧（ROS）染色检测细胞衰老变化,流式细胞术分析细胞周期分布。Annexin V/PI双标流式细胞术和Hochest33342染色检测细胞存活和凋亡。用骨形态发生蛋白-2（BMP-2）诱导不同年龄组MCSCs向心肌细胞分化,通过RT-PCR检测诱导后心肌早期转录因子和心肌特异基因的表达,并通过免疫细胞化学染色检测各年龄组细胞经（BMP-2）诱导后细胞内心肌特异性肌钙蛋T（cTnT）表达的变化。结果老年组MCSCs核质比减小,胞质内可见髓样小体。随着年龄增长,处于增殖期的MCSCs比例下降,β-半乳糖苷酶和ROS阳性细胞数目增多。老年组存活细胞比例较幼年组降低。用BMP-2诱导后4周,幼年组细胞的Nkx2.5、GATA-4和cTnT、Cx-43 mRNA表达明显,成年组和老年组细胞表达低于幼年组,差异有显著性意义。免疫细胞化学染色显示,BM...