山东某规模化鸡场鸡毒支原体的分离鉴定、基因分型、耐药性和致病性分析
作者机构：福建省农业科学院畜牧兽医研究所福建省畜禽疫病防治工程技术研究中心 佛山科学技术学院生命科学与工程学院
出 版 物：《微生物学通报》 (Microbiology China)
年 卷 期：2024年第10期
页 面：4230-4244页
核心收录：
学科分类：090601[农学-基础兽医学] 09[农学] 0906[农学-兽医学]
基 金：福建省属公益类科研院所基本科研专项(2024R1025004) 福建省农业科学院科技创新团队(CXTD2021014-3) 福建省农业科学院项目(2023KTP04) 福建省农业科学院“5511”协同创新重点项目(XTCXGC2021008)~~
主 题：鸡毒支原体 耐药性 多位点序列分型 MIC测定 致病性
摘 要：【背景】鸡毒支原体（Mycoplasma galliscepticum, MG）主要引起家禽慢性呼吸道疾病，不同地区MG菌株的耐药性和致病性差异大，给临床防控增加了难度。【目的】明确山东省烟台市某规模化鸡场MG分离株的基因分型、耐药情况及致病力，为该地区MG防控提供科学依据。【方法】从MG阳性鸡群上腭裂拭子分离、纯化获得MG分离株，利用atpG、plsC、mraW、ugpA、DUF3196、lgT和dppC共7个管家基因进行多位点序列分型（multilocus sequence typing, MLST）并构建系统发育树。测定分离株对金霉素、大观霉素、林可霉素、泰乐菌素、泰万菌素、泰妙菌素、沃尼妙林和多西环素的最小抑菌浓度（minimum inhibitory concentration, MIC），并对相关耐药基因23S rRNA基因V结构域、L4及L22蛋白基因进行测序分析。通过点眼攻毒和气管攻毒两种方式感染28日龄SPF鸡，评价感染10、20和30 d后气囊炎的发病率、气管组织MG载量和病理损伤。【结果】分离纯化获得9株MG，并首次发现菌株YTX2、YTX5.6、YTX11、YTX12、YTX13、YTX14和YTX15的管家基因plsC和mraW为新的等位基因，ID号分别为33和31，这7株MG分离株属于ST97型，而菌株YTX9和YTX10属于ST16型。所有MG分离株对沃尼妙林和泰妙菌素敏感（MIC≤0.25μg/mL），对泰万菌素和多西环素次之（MIC≤4μg/mL），对金霉素和林可霉素有一定程度耐药（MIC≥16μg/mL）；属于ST97的7个MG分离株对泰乐菌素存在中等程度耐药（MIC:4-8μg/mL）；选取菌株YTX5.6、YTX2和YTX10对耐药性相关的23S rRNA基因V结构域、L4和L22蛋白基因测序分析，菌株YTX5.6和YTX2在23S rRNA基因V结构域发生A2069G突变；菌株YTX5.6和YTX2的L4蛋白基因出现G568T突变，在L22蛋白基因上出现T102C、T129C、T252C、C336T和G404A突变；对泰万菌素、泰乐菌素、泰妙菌素、沃尼妙林和多西环素敏感的YTX10株与对照菌株MG Rlow株序列一致，未发生突变。在感染后10、20和30 d，菌株YTX5.6气管攻毒组气囊炎发病率分别为80%、60%和80%；菌株YTX10气管攻毒组仅在感染后20 d和30 d出现气囊炎，发病率分别为40%和20%，其余组在整个实验过程中均未发现明显气囊炎。气管攻毒组的鸡在整个感染过程中气管黏膜增厚情况均比点眼攻毒组严重（P0.05），菌株YTX5.6气管攻毒组在感染后第20天气管黏膜增厚最严重，平均厚度为300.6μm。菌株YTX5.6和YTX10气管攻毒方式在感染10、20和30 d后，气管中的MG载量均比菌株YTX5.6和YTX10点眼攻毒方式高。【结论】本研究从山东省烟台市某规模化鸡群共分离出9株MG菌株，分别属于ST97和ST16基因型，分离株对目前常用抗生素存在不同程度的耐药性，动物感染试验表明不同基因型菌株存在不同致病力。
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