锦绣黄桃漆酶基因PpLAC7的克隆、亚细胞定位及表达分析

作     者：龚意辉 张灿美 周桂花 陈玫羽 谭倩 皮水勤 曾永贤 

作者机构：湖南人文科技学院农业与生物技术学院 

出 版 物：《华北农学报》 (Acta Agriculturae Boreali-Sinica)

年 卷 期：2024年第05期

页      面：72-79页

核心收录：

学科分类：09[农学] 0902[农学-园艺学] 090201[农学-果树学] 

基　　金：湖南省自然科学区域联合基金项目(2024JJ7235) 

主　　题：锦绣黄桃 PpLAC7基因 果肉褐变 基因克隆 生物信息学分析 亚细胞定位 

摘      要：为克隆锦绣黄桃漆酶基因PpLAC7序列，分析PpLAC7基因序列信息及其在果肉褐变中的作用。以锦绣黄桃为试材，采用同源克隆方法从锦绣黄桃中获得漆酶基因PpLAC7的cDNA序列。采用生物信息学软件对PpLAC7基因的启动子元件、蛋白质理化性质、蛋白质二级、三级结构、系统发育进化树和同源氨基酸序列比对进行分析。此外还对PpLAC7基因进行亚细胞定位以及在果肉褐变过程中的表达规律进行了分析。生物信息学分析表明，PpLAC7的启动子区域含有光响应元件、茉莉酸响应元件、干旱响应元件、种子特异性调控等元件。PpLAC7基因全长为1 692 bp,其蛋白质共编码563个氨基酸，分子质量为61.867 ku,总原子数为8 621个，亲水系数为-0.028,理论等电点为5.95,不稳定指数为36.48,脂溶性指数为87.26。PpLAC7蛋白的α-螺旋、延长链、β-转角、无规则卷曲分别占氨基酸总数的14.74%,28.77%,6.22%,50.27%。进化树结果显示，PpLAC7基因与苹果MdLAC7基因具有较高的同源性，PpLAC7基因的氨基酸序列同样含有3个典型的铜离子结构域。亚细胞定位结果表明，PpLAC7定位于内质网。PpLAC7基因在锦绣黄桃果肉褐变过程中呈大量上调表达。结合锦绣黄桃果肉褐变指数与PpLAC7表达量的关系，推测PpLAC7可能在锦绣黄桃果肉褐变过程中起重要的作用。