壳聚糖水凝胶/聚丙烯网片复合材料修复大鼠腹壁缺损的实验研究
作者机构:保定市第四中心医院普外二科 北京航空航天大学生物与医学工程学院生物力学与力生物学教育部重点实验室北京市生物医学工程高精尖创新中心 保定市第四中心医院病理科 保定市第四中心医院神经外一科
出 版 物:《中国修复重建外科杂志》 (Chinese Journal of Reparative and Reconstructive Surgery)
年 卷 期:2024年
核心收录:
学科分类:1002[医学-临床医学] 08[工学] 100210[医学-外科学(含:普外、骨外、泌尿外、胸心外、神外、整形、烧伤、野战外)] 080501[工学-材料物理与化学] 0805[工学-材料科学与工程(可授工学、理学学位)] 080502[工学-材料学] 10[医学]
基 金:国家自然科学基金资助项目(32171345) 河北省自然科学基金资助项目(C2022104003)
摘 要:目的 探究复合壳聚糖(chitosan,CS)水凝胶对于传统聚丙烯(polypropylene,PP)网片修复腹壁缺损的改善效果与机制。方法 通过物理交联方式制备CS水凝胶,并将其与PP网片复合,制备CS水凝胶/PP网片复合材料,采用大体观察、正置金相显微镜观察、扫描电镜观察及水接触角检测方法对复合材料内部结构、亲水性等进行表征。通过成纤维细胞(NIH-3T3)浸润实验和人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)管形成实验检测复合材料(实验组)抗细胞黏附和支持细胞长入的性能,以单纯细胞作为对照组。最后取18只8~10周龄SD大鼠建立双侧腹壁缺损模型(1.5 cm×1.0 cm),两侧分别使用复合材料(实验组)和PP网片(对照组)修补缺损,通过大体观察、组织学染色(HE染色和Masson染色)和免疫组织化学染色(CD31、CD68)探究其促进伤口愈合、抗粘连、血管生成和抗炎等性能。结果 复合材料呈浅黄色透明固态,厚度2~3 mm,PP网片牢固包裹在水凝胶中;扫描电镜观察示,水凝胶具有100~300μm的连通孔隙,形成多孔结构;表面接触角测量结果示,CS水凝胶表现出良好亲水性,而PP网片则高度疏水。在体外细胞培养实验中,DAPI染色示,实验组阳性细胞数量在培养1 d时较少,而对照组细胞覆盖了整个孔板;培养3 d,实验组材料能够减少细胞黏附同时支持细胞长入。HUVECs管形成实验示,实验组细胞数量增加且有形成管的趋势,而对照组细胞分布稀疏,未见迁移。大鼠腹壁缺损修复实验结果示,术后1周,实验组已有组织和血管长入,术后4周完整性恢复良好,肌肉和血管再生明显;而对照组则有粘连且缺损未愈合。HE染色示,实验组细胞浸润较弱,且细胞密度在术后2、4周显著高于对照组(P0.05)。免疫组织化学染色示,实验组CD31阳性细胞均匀分布于肌肉层间,而对照组缺损明显,术后2周CD31阳性细胞比明显高于对照组(P0.05);术后2、4周,实验组CD68阳性细胞比显著低于对照组(P0.05)。结论 CS水凝胶对于抗粘连和伤口愈合有积极作用,可以在愈合过程中抗炎和促血管生成,为解决与腹部粘连和重建问题提供了有希望的策略。