芪芎左归复方干预骨髓间充质干细胞外泌体对缺血性脑卒中大鼠血脑屏障通透性的影响及抗衰老作用

作     者：要莹莹 樊飞燕 李少康 施艾每 杨俊红 张运克 YAO Ying-ying;FAN Fei-yan;LI Shao-kang;SHI Ai-mei;YANG Jun-hong;ZHANG Yun-ke

作者机构：河南中医药大学第一临床医学院河南郑州450046 河南中医药大学第一附属医院河南郑州450000 

出 版 物：《中国中药杂志》 (China Journal of Chinese Materia Medica)

年 卷 期：2024年第49卷第18期

页      面：5016-5024页

核心收录：

学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

基　　金：河南省中原英才计划(育才系列)-中原科技创新领军人才项目(224200510027) 河南省中医药科学研究专项(2023ZY1030) 河南省中医学“双一流”创建科学研究专项(HSRP-DFCTCM-2023-1-04) 

主　　题：骨髓间充质干细胞 脑卒中 芪芎左归复方 衰老 外泌体 血脑屏障 

摘      要：探讨芪芎左归复方干预骨髓间充质干细胞(bone marrow stem cells,BMSCs)外泌体对衰老大脑中动脉栓塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)大鼠血脑屏障(blood-brain barrier,BBB)的修复作用及抗衰老的作用机制。采用D-半乳糖致衰老法联合线栓法建立衰老MCAO复合模型,实验设青年假手术组、衰老假手术组、模型组、外泌体组、中药干预的外泌体组,使用β-半乳糖苷酶(SA-β-gal)染色联合TTC染色评估模型的建立情况,术后2 h及脑缺血再灌注后48、96 h外泌体组及中药干预的外泌体组分别于尾静脉注射相应的外泌体。造模成功后2 h、3 d、7 d进行神经功能缺损评分;第7天通过新物体识别实验检测认知功能、磁共振观察脑梗死体积;伊文思蓝染色评价BBB通透性;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测脑组织中紧密连接蛋白ZO-1、Occludin的表达;酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清基质金属蛋白酶(MMP)-9、MMP-2水平;SA-β-gal染色检测衰老细胞情况;反转录实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测p21 mRNA的表达,实时荧光定量PCR(qPCR)检测端粒相对长度。结果显示,芪芎左归复方干预BMSCs外泌体能显著降低衰老MCAO大鼠脑梗死体积,改善神经功能缺损评分,提高认知功能;并能抑制MMP-2、MMP-9表达,促进紧密连接蛋白ZO-1、Occludin的表达,降低BBB的通透性;同时还能降低p21 mRNA的表达,延长端粒长度,延缓细胞衰老。综上,芪芎左归复方干预BMSCs外泌体可能通过降低MMP-2、MMP-9含量,提高ZO-1、Occludin表达水平来修复BBB,同时其抗衰老机制可能与降低p21 mRNA的表达、限制端粒缩短有关。