藤椒油粕黄酮类成分的提取纯化工艺及成分鉴定和抑菌作用研究
[藤椒油粕黄酮类成分的提取纯化工艺及成分鉴定和抑菌作用研究]作者机构:成都中医药大学药学院药食两用中药研究所西南特色中药资源国家重点实验室
出 版 物:《中草药》 (Chinese Traditional and Herbal Drugs)
年 卷 期:2024年第55卷第18期
页 面:6196-6207页
核心收录:
学科分类:1008[医学-中药学(可授医学、理学学位)] 1006[医学-中西医结合] 100602[医学-中西医结合临床] 10[医学]
基 金:四川省高校科研创新团队建设计划项目(18TD0017)
摘 要:目的 建立藤椒Zanthoxylum armatum油粕中黄酮类成分的提取纯化工艺,鉴定提取纯化物中的化学成分,并评价其抗细菌作用。方法 以总黄酮提取率为考察指标,通过单因素实验和Box-Behnken设计-响应面试验优化提取工艺。以总黄酮转移率、提取纯化物得率和总黄酮质量分数为考察指标,通过大孔吸附树脂类型、上样溶液pH值和乙醇体积分数、洗脱剂种类和用量等因素考察优化纯化工艺。对整合的提取纯化工艺进行6次重复性试验。利用UPLC-Q-TOF-MS/MS技术鉴定提取纯化物中的化学成分。采用抑菌圈法及微量稀释法检测提取纯化物的抑菌效果。结果 藤椒油粕先用石油醚回流提取3次,料液比1∶10,每次提取60 min;再用65%乙醇回流提取130 min,料液比1∶20。提取液浓缩后,调节乙醇体积分数为10%~15%,调节pH值至3.0。将酸性乙醇溶液上样至HPD500树脂柱,先用5倍柱体积水洗脱,再用60%乙醇洗脱。乙醇洗脱液经浓缩干燥,得总黄酮提取纯化物。从该提取纯化物中鉴定了32种成分,包括23种黄酮、6种酚酸和3种酰胺。该提取纯化物对金黄色葡萄球菌Staphylococcus aureus和表皮葡萄球菌S. epidermidis的抑菌圈直径分别为(15.43±0.25)mm和(15.16±0.09)mm,最小杀菌质量浓度分别为5mg/mL和5mg/mL;对大肠杆菌Escherichiacoli和铜绿假单胞菌Pseudomonas aeruginosa未形成明显的抑菌圈,最小抑菌质量浓度分别156.25μg/mL和312.50μg/mL。结论 建立的藤椒油粕中黄酮类成分的提取纯化工艺稳定,提取效率高,纯化效果好。该提取纯化物主要成分为黄酮类成分,对金黄色葡萄球菌和表皮葡萄球菌具有抑制作用。