肝细胞癌中差异表达N-连接糖蛋白的分析鉴定

作     者：马瑾 齐义军 刘瑞敏 王明 张天 朱晗 马远方 MA Jin;QI Yi-jun;LIU Rui-min;WANG Ming;ZHANG Tian;ZHU Han;MA Yuan-fang

作者机构：河南大学医学院细胞与分子免疫学重点实验室河南开封475004 

出 版 物：《解剖学报》 (Acta Anatomica Sinica)

年 卷 期：2014年第45卷第4期

页      面：493-499页

核心收录：

学科分类：0710[理学-生物学] 1002[医学-临床医学] 1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 1010[医学-医学技术（可授医学、理学学位）] 100214[医学-肿瘤学] 0703[理学-化学] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金资助项目(81072039) 河南省高等学校青年骨干教师资助项目(2011) 

主　　题：原发性肝癌 糖蛋白 组织蛋白酶D 触珠蛋白 人羧酸酯酶1 二维电泳 质谱 人 

摘      要：目的分析鉴定与肝细胞癌(HCC)发生发展相关的差异表达的N-连接糖蛋白。方法应用刀豆蛋白凝集素(ConA)、晶状体凝集素(LCH)和雪花凝集素(GNA)组成的亲合层析柱富集10对HCC和癌旁非癌组织中N-连接糖蛋白、二维电泳(2DE)比较分析差异表达的蛋白质点、串联质谱鉴定差异表达蛋白,Western blotting验证人羧酸酯酶1(hCE1)、触珠蛋白(HP)及组织蛋白酶D(CD)的差异表达;体外侵袭实验检测CD表达沉默后对HCC的侵袭力影响。结果质谱、生物信息学等技术鉴定了28个与HCC相关的差异表达蛋白(HCC中高表达和低表达的蛋白均为14个),Western blotting验证hCE1、HP在HCC中明显低表达,组织蛋白酶D前体(pCD)在HCC中高表达;而ConA亲和层析柱富集的ConA-CD在HCC中显著高表达。CD-siRNA介导的CD表达沉默能够显著降低肝癌细胞系SNU449、SNU473的体外侵袭能力。结论 HP、hCE1蛋白表达变化和CD N-糖链变异可能参与了HCC发生发展过程。